[发明专利]一种评估培养基或消毒剂的菌种源、制备方法和使用方法在审
申请号: | 202110265651.3 | 申请日: | 2021-03-11 |
公开(公告)号: | CN112980729A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 刘辉;刘岚铮;陈潇;崔雯;时玉雯;胡光春;刘铭 | 申请(专利权)人: | 济南市疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16;C12N1/04;C12N11/12;C12N11/082;C12N11/089;C12N11/096;C12Q1/06;C12Q1/10;C12Q1/14;C12Q1/18;C12R1/42;C12R1/725;C12R1/19 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 张晓鹏 |
地址: | 250021 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 评估 培养基 消毒剂 菌种 制备 方法 使用方法 | ||
1.一种评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:具体步骤为:
对微孔滤膜进行灭菌处理;
将保藏的菌株在培养基上传代复苏;
将复苏后的菌株使用菌体冻干保存成分所配制的保存液进行稀释,得到菌液;
将菌液加载到微孔滤膜上,然后将得到的微孔滤膜进行冻干,得到菌种。
2.如权利要求1所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:微孔滤膜,材质为混合纤维素、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚醚砜和尼龙,优选混合纤维素;
或,微孔滤膜的直径3cm-9cm,微孔孔径0.1um-1.0um。
3.如权利要求1所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:保藏的菌株为可溯源的菌种保藏机构来源的标准菌株传代而来的菌体,或者经过实验室验证的稳定具备其所属菌种代表性特征的菌株传代而来的菌体。
4.如权利要求3所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:培菌体冻干保存成分包括营养成分和冻干保护剂,冻干保护剂为甘油,营养成分为蛋白类或糖醇类或氨基酸或上述几种物质的复配。
5.如权利要求4所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:蛋白类包括人血清白蛋白、胎牛血清、脱脂奶粉、全脂奶粉、卵清蛋白或酪蛋白的一种或几种;
或,糖醇类包括海藻糖、蔗糖、甘油、麦芽糖、果糖、半乳糖、葡萄糖、乳糖山梨醇、甜菜碱和阿东糖的一种或几种;
或,菌株复苏的过程中,菌株在培养基上传代复苏1-3次;
或,复苏过程中培养基为固体培养基或液体培养基。
6.如权利要求5所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法,其特征在于:苏的菌株通过菌体冻干保存成分稀释后的浓度不高于103CFU/ml;
或,菌体加载到微孔滤膜上的方法为:将菌液经过过滤、涂布、喷洒或多点加样的方法;优选为过滤法;
或,冻干的方法为,将载有菌液的微孔滤膜在-15~-25℃的条件下进行冷冻干燥。
7.权利要求1-6任一所述的评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法得到的评估培养基和消毒剂用的菌种源;
优选的,还包括支撑材料,支撑材料包裹冻干后的菌种,支撑材料包括无菌保护材料和无菌包材。
8.权利要求7所述的菌种源在固体培养基的评估方面的应用。
9.利用权利要求7所述的菌种源进行固体培养基的评估的方法,其特征在于:具体步骤为:
将微孔滤膜贴放于拟评估培养基上,进行培养;
然后进行计数菌数和菌落形态特征,与微孔滤膜原始标定量或平行富营养培养基培养计数比对。
优选的,在冻干完成后,即将菌种置于富营养培养基上,培养后,计数菌量,作为菌数的原始标定量。
10.利用权利要求7所述的菌种源进行消毒剂的评估的方法,其特征在于:具体步骤为:
用消毒剂处理微孔滤膜;
将微孔滤膜贴放于拟评估培养基上,进行培养;
然后进行计数菌数和菌落形态特征,与微孔滤膜原始标定量或平行富营养培养基培养培养计数比对。
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