[发明专利]一种评估培养基或消毒剂的菌种源、制备方法和使用方法

说明书

本发明涉及一种评估培养基或消毒剂的菌种源、制备方法和使用方法。评估培养基的菌种源的制备方法，具体步骤为：对微孔滤膜进行灭菌处理；将保藏的菌株在培养基上传代复苏；将复苏后的菌株使用菌体冻干保存成分所配制的保存液进行稀释，得到菌液；将菌液加载到微孔滤膜上，然后将得到的微孔滤膜进行冻干，得到菌种。使实验室可直接购买产品即用，不必再进行相应菌株的保藏管理工作，从而解放相应的检验人员和资源。

技术领域

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种评估培养基或消毒剂的菌种源、制备方法和使用方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

微生物培养，特别是细菌培养，是微生物检测方法中最重要的方法之一。因可以获得特定的目标菌，特异性好，使用适宜的培养基和培养条件，敏感性也好，培养法一般作为金标准使用。且获得的目标菌后期可进行耐药试验、分型试验，基因组分析、蛋白组和代谢组分析，毒力分析及功能活性分析等，具有好的后续延展性。所以培养法对于微生物检测具有基础性和决定性的作用。

培养法中最为关键的步骤是固体培养法，即在固体培养基表面使检样中的混合微生物经划线分离培养获得单个菌落纯培养物。固体培养法因其操作简单、成本低廉、分离效果优良，自19世纪末期，由德国微生物学家科赫发明以来，一直被微生物检测者作为培养法的核心步骤和基础部分来应用，并且到目前为止无可替代之法。而培养基的成份相对复杂，不同厂家，同一厂家不同批次的培养基因原料来源、生产工艺等问题的存在会存在一定的质量风险。但微生物检测结果的可靠性和准确性标准要求培养基必须稳定和可靠，因此目前行业公认必须对每一批次的培养基进行评估。

目前培养基评估比较通用的方法为ISO和GB4789.28等标准方法，尽管标准不同，但其基本的方法内容基本相同，对于固体培养基主要是定量法、半定量法和定性法。不管哪一种方法，都需要将保藏的相关标准菌株复苏培养，再进行相关划线和涂布操作等，对于从事检验的人员，过程相对复杂；而且进一步相关标准菌株的保藏、管理，需要专用菌株保存冰箱，房间等设备，需要专门的人员管理和评估等，且需进行繁杂的生物安全管理和记录，耗费了大量的人力物力财力。

与上述原理类似的是，对于消毒剂的评估，按照消毒技术规范或GB/T 38502-2020消毒剂实验室杀菌效果检验方法,也需要每次提前菌株复苏，然后制作滴染载体，常温或热干燥，然后用消毒剂处理，处理后进行相关培养，过程复杂。因此处理方法菌株保存时间很短，需每次实验前现制备，耗费人力物力财力。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种评估培养基或消毒剂的菌种源、制备方法和使用方法。

为了解决以上技术问题，本发明的技术方案为：

一种评估培养基或消毒剂的菌种源的制备方法，具体步骤为：

对微孔滤膜进行灭菌处理；

将保藏的菌株在培养基上传代复苏；

将复苏后的菌株使用菌体冻干保存成分所配制的保存液进行稀释，得到菌液；

将菌液加载到微孔滤膜上，然后将得到的微孔滤膜进行冻干，得到菌种。

解决的问题：

1、定量和半定量的问题，即得到的菌种可以直接让待评估培养基进行计数，现有的标准菌株保存使用冻干粉或冻干微球等方式，均无法直接计数。本发明使用微孔滤膜作为载体，因此每个菌体在膜上可均匀分布，从而培养后形成单菌落，可以实现计数功能。