[发明专利]检测高尿酸血症相关基因的突变位点的引物、检测试剂盒和检测方法

权利要求书

1.一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的引物，其特征在于，包括：用于扩增DNA样品连接产物的引物和用于扩增捕获文库的引物，所述用于扩增DNA样品连接产物的引物的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；所述的用于扩增捕获文库的引物的序列如SEQID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

2.如权利要求1所述的引物，其特征在于，所述DNA样品连接产物，其是通过提取人SLC17A3基因组DNA并进行DNA片段化，获得DNA样品，然后将DNA样品依次通过磁珠纯化、末端修复、磁珠纯化、3'端加A碱基、磁珠纯化、两端加接头序列而成。

3.如权利要求1所述的引物，其特征在于，所述捕获文库，其是将DNA样品连接产物依次通过磁珠纯化、与生物素标记的探针杂交、捕获获得。

4.一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的检测试剂盒，其特征在于，包括用于扩增DNA样品连接产物的反应体系和用于扩增捕获文库的反应体系；

所述用于扩增DNA样品连接产物的反应体系包括带有不同序列标签的连接产物文库、无核酸酶水、如权利要求1-3任一项所述的用于扩增DNA样品连接产物的引物、5×PCRBuffer、100mM dNTP Mix、DNA聚合酶；

所述用于扩增捕获文库的反应体系包括捕获文库、无核酸酶水、5×PCR Buffer、如权利要求1-3任一项所述的用于扩增捕获文库的引物、100mM dNTP Mix、DNA聚合酶。

5.如权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述用于扩增DNA样品连接产物的反应体系包括带有不同序列标签的连接产物文库15μL、无核酸酶水21μL、上述所述的用于扩增DNA样品连接产物的引物各1.25μL、5×PCR Buffer 10μL、100mM dNTP Mix 0.5μL、DNA聚合酶1μL。

6.如权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述用于扩增捕获文库的反应体系包括捕获文库14μL、无核酸酶水22.5μL、5×PCR Buffer 10μL、上述所述的用于扩增捕获文库的引物各1μL、100mM dNTP Mix 0.5μL、DNA聚合酶1μL。

7.一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、提取人SLC17A3基因组DNA并进行DNA片段化，获得DNA样品，然后将DNA样品依次通过磁珠纯化、末端修复、磁珠纯化、3'端加A碱基、磁珠纯化，获得DNA样品连接产物；接着，以DNA样品连接产物为模板进行PCR扩增；

步骤二、DNA样品连接产物依次通过磁珠纯化、与生物素标记的探针杂交、捕获获得捕获文库，接着以捕获文库为模板进行PCR扩增；

步骤三、将步骤二的PCR扩增产物进行磁珠纯化；然后进行定量，使用Q-PCR进行质检；接着，使用高通量二代测序技术进行末端测序，检测是人SLC17A3基因否存在突变位点c.298GA、c.1344TC、c.577TG中的一个或多个。

8.一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的检测试剂盒的应用，其特征在于，其用于非疾病诊断和治疗目的的检测人SLC17A3基因的基因突变信息来对检测对象进行分子分型。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述基因突变信息包括尿酸排泄关键路径的基因的等位基因检测结果。