[发明专利]检测高尿酸血症相关基因的突变位点的引物、检测试剂盒和检测方法

说明书

本发明公开了一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的引物，包括：用于扩增DNA样品连接产物的引物和用于扩增捕获文库的引物，所述用于扩增DNA样品连接产物的引物的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；所述的用于扩增捕获文库的引物的序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明还公开了一种检测高尿酸血症相关基因的突变位点的检测试剂盒及其检测方法。本发明通过利用分子分型的方法辅助临床诊断，有利于医生选择和研究更具针对性的个性化治疗药物。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，是关于一种检测高尿酸血症相关基因突变位点的引物、检测试剂盒和检测方法。

背景技术

高尿酸血症是一组由于尿酸生成增加和/或肾脏和肠的排泄减少引起的以高尿酸血症为特征的慢性代谢性疾病。血尿酸水平的升高，是导致一系列并发症发生发展的原因。血尿酸超过其在血液或组织液中的饱和度可在关节局部形成尿酸钠晶体并沉积，诱发局部炎症反应和组织破坏，即痛风；可在肾脏沉积引发急性肾病、慢性间质性肾炎或肾结石，称之为尿酸性肾病。国内外研究表明高尿酸血症和痛风是慢性肾病、高血压、心脑血管疾病及糖尿病等疾病的独立危险因素，是过早死亡的独立预测因子。在全球范围内，高尿酸血症在不同种族中的患病率为2.6％-36％，痛风为0.03％～15.3％。Meta分析显示，中国高尿酸血症的总体患病率为13.3％，痛风为1.1％，已成为继糖尿病之后又一常见代谢性疾病，据推算中国目前有1.8亿的高尿酸血症的患者。近年来，随着人们生活水平的提高、饮食条件的改善，高尿酸血症的患病率呈现明显上升和年轻化趋势。最新的数据显示，中国山东12-18岁中男性高尿酸血症的患病率高达42.3％，其中高尿酸血症的阳性家族史是高尿酸血症发生的重要危险因素。

遗传危险因素和生活方式危险因素共同造成高尿酸血症及痛风的形成，其中大约90％的高尿酸血症和痛风患者是由于尿酸排泄量减少和尿酸的重吸收增多引起的。GWAS表明ABCG2、SLC17A1和SLC2A9等基因功能缺陷型变异是引起尿酸排泄障碍的主要遗传因素。SLC17A3编码磷酸钠转运蛋白(NPT4)，其大鼠同源物位于肾近端小管细胞的顶膜。该基因编码的蛋白质与尿酸的转运有关，是有机阴离子转运蛋白，协同转运尿酸排泄。国外研究也表明该基因基因与尿酸浓度和痛风风险相关。

目前高尿酸血症和痛风最准确的检测方法为关节滑液或痛风石的抽吸物中的尿酸盐晶体检测，但是尿酸盐晶体检测不仅会带给患者创伤和较重的疼感，而且关节滑液的穿刺吸取比较困难。除临床指征外，其他辅助检测包括：影像诊断(常规X线放射，超声，双能CT)，血尿酸检测，尿酸检测。这些检查都需要昂贵的高端设备，费用高，步骤多，耗时长，更重要的是，这些检查需要医学专业人士承担，不可能作为家用辅助诊断和疾病长期监控指标。所以，痛风的分子生物学研究日益受到国内外的重视，需要敏感而特异性的无创性的血清学指标，从分子水平上提高对痛风的检测水平。此外，病理形态相同的高尿酸血症，可能在分子水平上呈现高度异质，因此以致病基因位点为基础提出的高尿酸血症基因分型，能更精确地反应该病的生物学行为，判断预后，并有利于选择和研究更具针对性的个性化治疗药物。

发明内容

本发明针对现有的技术不足，其目的是研究一种可以快速、准确、适于区分高尿酸血症及痛风疾病的临床分子诊断与分型方法，以便于医生对高尿酸血症及痛风相关疾病进行临床分型及指导用药。经研究，本发明的方法可以辅助检测肾脏排泄不良型高尿酸血症和痛风。因此，本发明的第一个目的是提供一种检测肾脏排泄不良型高尿酸血症相关基因的突变位点的引物。本发明的第二个目的是提供一种检测肾脏排泄不良型高尿酸血症相关基因的突变位点的检测试剂盒。本发明的第三个目的是提供一种检测肾脏排泄不良型高尿酸血症相关基因的突变位点的检测方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：