[发明专利]海洋抗胶质瘤天然活性物质链霉萘啶A及制备和用途

说明书

本发明提供一种海洋抗胶质瘤天然活性物质链霉萘啶A及制备和用途，本发明从海洋沉积物中的链霉菌的代谢产物中分离得到，所述链霉菌分类命名为Streptomycessp.SY2111，保藏编号:CCTCC M 2021154。所述链霉萘啶A可显著抑制人胶质瘤U87MG和U251细胞的增殖，可制备抗胶质瘤药物，为胶质瘤的治疗提供一种新的药物分子。链霉萘啶A的化学结构式为：。

技术领域

本发明属医药领域,涉及从海洋链霉菌Streptomyces sp.SY2111培养物的代谢产物中获得具有抗胶质瘤活性的新化合物链霉萘啶A(streptonaphthyridine A)及其制备方法和在制备抗胶质瘤药物中的应用。

背景技术

胶质瘤是一种常见和死亡率高的脑肿瘤，目前对胶质瘤治疗方式主要包括手术切除、放疗和以替莫唑胺为主的药物疗。但是，由于胶质瘤呈侵袭性生长，肿瘤组织与正常组织无明显界限，而且，胶质瘤多位于脑的重要功能区，因此手术切除无法完全去除病灶组织。而放疗毒副作用大。因此，药物对胶质瘤的治疗具有更重要的意义。然而，目前用于胶质瘤治疗的药物极为有限，替莫唑胺是唯一一个可单独用于胶质瘤治疗的药物，也是目前治疗胶质瘤的金标药，但仍然存在毒性和耐药性等问题。尽管分子靶向药物为肿瘤的治疗开辟了新途径，但是靶向药物在胶质瘤治疗方面并未取得预期的治疗效果。显然，临床上需要疗效更好、安全性更高和作用机制独特的新型抗胶质瘤药物。

海洋深渊特殊的生境使深渊微生物可能与浅海微生物有不同的适应机制和代谢途径，从而产生结构新颖和生物活性独特的次生代谢产物。马里亚纳海沟是目前已知的海洋最深处，可达11000米。近几年，随着深海勘探技术的发展，对马里亚纳海沟深渊微生物的研究也越来越多，表明马里亚纳海沟微生物资源丰富。然而，目前对马里亚纳海沟微生物代谢产物的研究不多，只有零星报道。大量研究表明，海洋微生物因其生境特殊、遗传可控、可放大发酵等特性逐渐在海洋生物研究中成为研究重心，其中，放线菌是发现抗肿瘤药或药物先导化合物的重要来源。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种海洋抗胶质瘤天然活性物质链霉萘啶A(streptonaphthyridine A)，是一个新化合物，其化学结构式为：

本发明的第二个目的是提供链霉萘啶A的制备方法，通过以下步骤实现：

(1)链霉菌Streptomyces sp.SY2111的分离培养

取空气干燥的海底沉积物用灭菌自来水溶解后摇床振荡过夜，将样品混悬液稀释成一定的浓度，取一定量的样品稀释液均匀分散到含有固体培养基的培养皿中，在室温条件下培养一定时间后,将不同的菌落分别转移到另一含有固体培养基的培养皿中，在室温条件下继续培养一定时间。最后将生长良好的SY2111单一菌落接种到斜面培养基培养后置4℃冰箱保存备用。

所述的海底沉积物是从马里亚拉海沟7281米深的海域获得；所述样品稀释液的浓度为1×10^-4～1×10^-2g/mL；所述振荡的转速为160～180rpm；所述样品稀释液的取样量为200μL；所述培养皿和斜面培养的固体培养基均为高氏琼脂培养基；所述的室温培养温度为20～28℃；所述的培养时间为7～14天。

(2)链霉菌Streptomyces sp.SY2111的菌种鉴定

上述步骤(1)分离培养所获得的菌株SY2111用目前实验室普遍使用的16S rDNA序列分析方法鉴定其种类，确定为链霉菌，分类命名为Streptomyces sp.SY2111，已被中国典型培养物保藏中心-武汉中心保藏，保藏编号:CCTCC M 2021154。

(3)链霉菌Streptomyces sp.SY2111培养物的制备