[发明专利]一种用于分离柠檬酸和异柠檬酸的衍生试剂盒和方法

权利要求书

1.一种分离柠檬酸和异柠檬酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，利用衍生试剂对包含柠檬酸和异柠檬酸的样本进行衍生；

S2，利用高效液相色谱质谱对衍生后的样本进行分离，收集保留时间为2.5-2.8min的组分，为异柠檬酸；收集保留时间为2.85-3.25min的组分，为柠檬酸，

所述衍生试剂为丁醇，

步骤S1所述利用衍生试剂对包含柠檬酸和异柠檬酸的样本进行衍生步骤具体为：

S11，取10-20μL所述样本，于60℃氮气吹干；

S12，加入100-300μL 3mol/L丁醇溶液，涡旋，于60℃震荡均匀，离心3-5min，于60℃氮气吹干；

S13，加入100-300μL甲醇复溶，

步骤S2所述利用高效液相色谱对衍生后的样本进行分离的条件为：采用ACE Excel-2C18-PFP柱，柱温30-40℃；进样量为10-100μL，流动相A为甲酸和乙酸铵的水溶液，流动性B为甲酸和乙酸铵的甲醇溶液；流速0.3mL/min，等度洗脱，80%流动相B，具体如下表：

时间/min	B相比例
0.00	80%
3.5	80%

。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相A水溶液中甲酸含量0.1-0.5%，乙酸铵含量0.5-5mM。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相B甲醇溶液中甲酸含量0.1-0.5%，乙酸铵含量0.5-5mM。