[发明专利]奈替米星核酸适配体及筛选和在奈替米星检测上的应用有效
申请号: | 202110269596.5 | 申请日: | 2021-03-12 |
公开(公告)号: | CN113073100B | 公开(公告)日: | 2022-07-26 |
发明(设计)人: | 王鲁梅;潘超强;沈国清;耿雪青 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;G01N33/58;G01N33/53 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 胡晶 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 奈替米星 核酸 适配体 筛选 检测 应用 | ||
1.一种奈替米星核酸适配体,其特征在于,所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种根据权利要求1所述的奈替米星核酸适配体的应用,其特征在于,所述奈替米星核酸适配体在制备奈替米星检测试剂、奈替米星检测试剂盒或奈替米星检测生物传感器上的应用;或
所述奈替米星核酸适配体在制备奈替米星捕获、分离或纯化试剂上的应用;或
所述奈替米星核酸适配体在开发奈替米星检测方法上的应用。
3.一种奈替米星检测用生物传感器,其特征在于,所述生物传感器以奈替米星核酸适配体为生物识别元件,所述奈替米星核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述生物传感器为基于SYBR Green I的荧光法检测奈替米星的生物传感器。
4.一种奈替米星检测方法,其特征在于,基于权利要求1所述奈替米星核酸适配体进行,包括以下步骤:
在奈替米星核酸适配体溶液中加入SYBR Green I溶液,混匀后进行第一次孵育,使得所述SYBR Green I荧光探针嵌入奈替米星核酸适配体所形成的双链当中;
在第一次孵育后的混合液中加入待测样品和缓冲液,混合后进行第二次孵育,对第二次孵育后的混合液进行荧光强度测定,并计算得到待测样品中萘替米星的含量。
5.根据权利要求4所述的奈替米星检测方法,其特征在于,所述SYBR Green I溶液的终浓度为0.8X,奈替米星核酸适配体溶液的终浓度为20 nM;
所述缓冲液pH值为7.0,采用MOPS 缓冲液;
第一次孵育的温度为25℃、孵育时间为30min;第二次孵育的温度为25℃、孵育时间为8min。
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