[发明专利]桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法

权利要求书

1.一种桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）精密称定桂枝芍药知母汤组合物，加水后以超声波处理，得到供试品溶液，桂枝芍药知母汤组合物处方为桂枝12g、白芍9g、知母12g、麻黄6g、炮附片6g、防风12g、生姜15g、白术5g和甘草6g；

（2）将没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、肉桂醇、肉桂酸、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、5-羟甲基糠醛、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、6-姜辣素、芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、异甘草苷、甘草酸铵、新芒果苷、芒果苷、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱对照品制成参照物溶液；

（3）精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入超高效液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为210nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定桂枝芍药知母汤组合物的标准指纹图谱；

所述步骤（3）中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流速0.25ml/min，柱温：30℃；

以流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液为系统进行梯度洗脱，洗脱顺序为：

0～6min，乙腈3％，0.1％磷酸溶液97％；

6～8min，乙腈3％→5％，0.1％磷酸溶液97％→95％；

8～16min，乙腈5％→8％，0.1％磷酸溶液95％→92％；

16～23min，乙腈8％→14％，0.1％磷酸溶液92％→86％；

23～29min，乙腈14％→16％，0.1％磷酸溶液86％→84％；

29～33min，乙腈16％，0.1％磷酸溶液84％；

33～45min，乙腈16％→35％，0.1％磷酸溶液84％→65％；

45～49min，乙腈35％→60％，0.1％磷酸溶液65％→40％；

49～53min，乙腈60％→95％，0.1％磷酸溶液40％→5％。

2.根据权利要求1所述的桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述标准指纹图谱包括33个特征峰，以15号峰芒果苷色谱峰为S峰，各特征峰的相对保留时间分别为：1号峰相对保留时间RRT为0.142，2号峰相对保留时间RRT为0.272，3号峰相对保留时间RRT为0.309，4号峰相对保留时间RRT为0.336，5号峰相对保留时间RRT为0.380，6号峰相对保留时间RRT为0.429，7号峰相对保留时间RRT为0.488，8号峰相对保留时间RRT为0.523，9号峰相对保留时间RRT为0.573，10号峰相对保留时间RRT为0.626，11号峰相对保留时间RRT为0.672，12号峰相对保留时间RRT为0.749，13号峰相对保留时间RRT为0.792，14号峰相对保留时间RRT为0.945，15号（S）峰相对保留时间RRT为1.000，16号峰相对保留时间RRT为1.013，17号峰相对保留时间RRT为1.043，18号峰相对保留时间RRT为1.053，19号峰相对保留时间RRT为1.067，20号峰相对保留时间RRT为1.081，21号峰相对保留时间RRT为1.129，22号峰相对保留时间RRT为1.178，23号峰相对保留时间RRT为1.197，24号峰相对保留时间RRT为1.253，25号峰相对保留时间RRT为1.307，26号峰相对保留时间RRT为1.327，27号峰相对保留时间RRT为1.396，28号峰相对保留时间RRT为1.608，29号峰相对保留时间RRT为1.895，30号峰相对保留时间RRT为1.916，31号峰相对保留时间RRT为1.926，32号峰相对保留时间RRT为2.190，33号峰相对保留时间RRT为2.243。

3.根据权利要求2所述的桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法，其特征在于，所述标准指纹图谱中1、7、8、12、13、15、18、21、23、25、26、28、29、31、32和33号色谱峰依次与没食子酸、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、儿茶素、新芒果苷、芒果苷、芍药内酯苷、芍药苷、升麻素苷、芹糖甘草苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、亥茅酚苷、甘草酸铵和6-姜辣素对照品色谱峰保留时间相对应。