[发明专利]桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法

说明书

本发明公开了一种桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法，该指纹图谱构建方法包括以下步骤：(1)精密称定桂枝芍药知母汤组合物，加水后以超声波处理，得到供试品溶液；(2)将没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱等22种对照品制成参照物溶液；(3)精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入超高效液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为210nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定桂枝芍药知母汤组合物的标准指纹图谱。通过该标准指纹图谱可全面的反应待检测产品的质量，能够有效的控制桂枝芍药知母汤制剂的产品质量。

技术领域

本发明涉及中药质量检测技术领域，尤其涉及一种桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法。

背景技术

桂枝芍药知母汤属于2018年国家中医药管理局会同国家药品监督管理局制订《古代经典名方目录（第一批）》中的100首经典名方之一。出自东汉名家张仲景《金匮要略》一书，该方由桂枝、附子（炮）、芍药、麻黄、生姜、白术、知母、防风和甘草九味药组成。其中桂枝和附子为君药，桂枝辛甘温，温通经脉，善利关节而祛风邪；附子辛甘大热，为通十二经纯阳之要药；两药合用能祛风除湿以通脉，温经散寒以助阳。麻黄、防风、白术为臣药，麻黄辛微苦温，防风辛甘微温，白术苦甘温，三者合用能疏风散寒，祛湿止痛。知母、芍药和生姜为佐药，知母清热滋阴，白芍养血和营，生姜和胃止呕。甘草为使药，调和诸药。本方具祛风除湿，温经宣痹，养阴清热之功，以桂枝、芍药、知母在方中的特殊性而命名，称之为桂枝芍药知母汤。

经典名方是指至今仍广泛应用、疗效确切、具有明显特色与优势的古代中医典籍所记载的方剂。中药汤剂是传统中医临床用药的主流，其中的经典名方更是中医药数千年临床实践的结晶，具有组方合理、疗效确切、安全性高等特点，为中医药理论的精髓之一，但煎煮、携带不便，标准难以统一，严重影响其临床应用，因此简便易用、满足现代生活节奏的经典名方标准颗粒的研发意义重大。经典名方临床疗效确切，运用现代分析技术对其质量进行控制，不仅保障了复方制剂的质量稳定，也能更好的促进经典名方的临床应用。

现有技术中也有关于桂枝芍药知母汤指纹图谱检测方法的研究，如专ZL201910285906 .5桂枝芍药知母汤的检测方法，以没食子酸、芒果苷、芍药苷、升麻素苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸和甘草酸铵为对照品，以50％甲醇提取桂枝芍药知母汤的成分，色谱条件的检测波长为254nm。然而，桂枝芍药知母汤由九味药制成，其中的化学成分多达几十甚至上百种，仅以八个化学对照品检测该药剂的质量，不能有效的进行质量控制。而且，该专利中以50％甲醇提取桂枝芍药知母汤的成分和以254nm波长进行检测，也影响质量控制的有效性。

发明内容

本发明的目的在于提出一种桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法，能够有效的控制桂枝芍药知母汤制剂的产品质量。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一种桂枝芍药知母汤组合物的指纹图谱构建方法，包括以下步骤：

（1）精密称定桂枝芍药知母汤组合物，加水后以超声波处理，得到供试品溶液；

（2）将没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、肉桂醇、肉桂酸、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、5-羟甲基糠醛、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、白术内酯、白术内酯、6-姜辣素、芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、异甘草苷、甘草酸铵、新芒果苷、芒果苷、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱对照品制成参照物溶液；

（3）精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入超高效液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为210nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定桂枝芍药知母汤组合物的标准指纹图谱。

进一步的，所述步骤（3）中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流速0.25ml/min，柱温：30℃；