[发明专利]一种基于乙醇梯度洗脱的止血材料及其制备方法

说明书

本发明公开一种基于乙醇梯度洗脱的止血材料及其制备方法：(1)将乙醇提取的精制纤维蛋白原反应液静置，离心，收集纤维蛋白原沉淀物；(2)向沉淀物中依次加入20％、40％、60％、80％、100％的乙醇进行梯度脱水；(3)然后离心，收集纤维蛋白原沉淀物并向沉淀物中加入有机溶剂，然后粉碎加入药用辅料，干燥，得到纤维蛋白原粉；(4)将乙醇提取的凝血酶反应液静置，离心，收集凝血酶沉淀物；(5)向凝血酶沉淀物中依次加入20％、40％、60％、80％、100％的乙醇进行梯度脱水；(6)最后一次脱水完成后离心，收集凝血酶沉淀物并向其中加入有机溶剂，粉碎后加入药用辅料，干燥，得到凝血酶粉；(7)将纤维蛋白原粉和凝血酶粉混合，辐射灭菌，得到止血材料。

技术领域

本发明涉及生物医用材料的技术领域，具体涉及一种基于乙醇梯度洗脱的止血材料及其制备方法。

背景技术

纤维蛋白粘合剂具有良好的止血、组织相容性和黏合性，能有效解决临床创面出血难以缝合及术后缝合渗血等问题。纤维蛋白粘合剂包含四组分：纤维蛋白原冻干粉及其稀释剂、凝血酶冻干粉及其稀释剂，整个制备工艺时间长且繁琐，除需将纤维蛋白原和凝血酶分装冻干以外，还需配备两瓶对应稀释剂。临床使用前需用对应稀释剂溶解两主成分，再混合使用，操作复杂，配制时间长，临床使用不便；且本品需低温贮存和冷链运输，成本较高，限制了其广泛应用。

CN201010200864.X公开了一种猪源纤维蛋白胶粉雾剂及其制备方法和应用。该方法需先制备纤维蛋白原冻干粉和凝血酶冻干粉，采用低温气流粉碎方法粉碎至75-180μm粒径，再与采用气流粉碎方法粉碎至90-250μm的氯化钠和/醋酸钠、氯化钙和/三羟甲基氨基甲烷、生理可接受的抗静电剂通过流化态混合方法进行混合，制得猪纤维蛋白胶微粉。整个制备工艺复杂，周期长，特别是纤维蛋白原冻干粉和凝血酶冻干粉需要冷冻干燥工艺，此工艺通常一次需要48-72小时。CN201480012686.4公开了包含凝血酶和纤维蛋白原的粉末制剂。该方法采用喷雾干燥技术分别制得纤维蛋白原粉和凝血酶粉，喷雾干燥过程中温度高，主成分活性降低明显，而且研究表明此方法收率较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于乙醇梯度洗脱的止血材料的制备方法，本发明的方法制备工艺简单、周期短、成本低。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种基于乙醇梯度洗脱的止血材料的制备方法，包括如下步骤：

一、纤维蛋白原粉制备：

(1)在低温条件下，将乙醇提取的精制纤维蛋白原反应液静置，然后离心，收集纤维蛋白原沉淀物；

(2)向所述纤维蛋白原沉淀物中依次加入20％、40％、60％、80％、100％体积分数的低温乙醇进行梯度脱水；在每次脱水过程中需将所述纤维蛋白原沉淀物粉碎，脱水后离心，收集沉淀物进行下一次脱水；

(3)最后一次脱水完成后离心，收集纤维蛋白原沉淀物并向沉淀物中加入有机溶剂，然后粉碎，粉碎后加入药用辅料，然后干燥，得到所述纤维蛋白原粉；

二、凝血酶粉的制备：

(1)在低温条件下，将乙醇提取的凝血酶反应液静置，然后离心，收集凝血酶沉淀物；

(2)向所述凝血酶沉淀物中依次加入20％、40％、60％、80％、100％体积分数的低温乙醇进行梯度脱水；在每次脱水过程中需将所述凝血酶沉淀物粉碎，脱水后离心，收集沉淀物进行下一次脱水；

(3)最后一次脱水完成后离心，收集凝血酶沉淀物并向沉淀物中加入无水乙醇，然后粉碎，粉碎后加入药用辅料，然后干燥，得到所述凝血酶粉；

三、止血材料的制备：

(1)将所述纤维蛋白原粉和所述凝血酶粉充分混合，然后辐射灭菌，得到所述止血材料。