[发明专利]一种筛选特异BCR/TCR的方法及其系统

权利要求书

1.一种筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别提取N个免疫后的待测样本淋巴细胞中的mRNA；

(2)逆转录处理步骤(1)所得mRNA后，再对其BCR/TCR可变区基因进行多重PCR扩增，然后进行高通量测序，并确定BCR/TCR可变区的核酸及氨基酸序列；

(3)将测序得到的序列与未经抗原刺激样本的淋巴细胞BCR/TCR测序结果对比，获得相应的特异性免疫序列；

其中，包括所述将所有免疫后样本的BCR/TCR序列归总去重,再去除所有与未经抗原刺激样本的BCR/TCR测序结果序列集中所包含序列相重复的序列，建立特征性BCR/TCR序列集的步骤；

所述步骤(3)中特异性免疫序列的具体获得方式为：

(1)从特征性BCR/TCR序列集中去除只在N×10％个免疫后样本中出现的序列；

(2)对特征性BCR/TCR序列集中所含有的共M种具有唯一性的BCR/TCR抗原决定簇3CDR3序列分别在N个免疫后样本测序结果中出现的次数进行统计，计为X_1,1、X_1,2、X_1,3······X_1,M,X_2,1、X_2,2、X_2,3······X_2,M,······,X_N,1、X_N,2、X_N,3······X_N,M；

(3)将特征性序列集中相同BCR/TCR CDR3序列在N个免疫后样本测序结果中出现次数求和，第j种CDR3序列出现次数之和为：

(4)将特征性序列集中所含有的共M种BCR/TCR CDR3序列按Y_j值从高至低排序，排序前100个或前M×10％个序列即为与抗原相对应的特异性BCR/TCR CDR3序列。

2.根据权利要求1所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于，所述待测样本为包含淋巴细胞的外周血、脾脏组织、肿瘤组织或体外培养的淋巴细胞。

3.根据权利要求1或2任一项所述的筛选特异性BCR/TCR的方法，其特征在于,所述待测样本为人源样本或动物源样本。

4.一种用于筛选特异性BCR/TCR的系统，其特征在于,所述系统采用权利要求1-3任一项所述的方法对特异性BCR/TCR进行筛选。