[发明专利]一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉及其制备方法

权利要求书

1.一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将牛胎盘细胞外泌体与赋形剂混合，得混合液：

将混合液预冻，制冷，抽真空，解析干燥；

所述赋形剂由甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐温、白蛋白和水组成。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述赋形剂由以下质量百分比的组分组成：

2.0％-10.0％甘露醇、0.1％-1.0％海藻糖、0.05％-1.0％甘氨酸、1.0％-5.0％甘油、0.01％-0.05％吐温、0.1％-0.5％白蛋白，其余为水。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述牛胎盘细胞外泌体与赋形剂的体积比为1:1。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述预冻为将混合液的温度降温至-40℃，保持190min；所述制冷为将预冻后的混合液制冷，1min由-40℃降温至-50℃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述解析干燥包括一次解析干燥和二次解析干燥。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述一次解析干燥为：70min由-50℃升温至-15℃，保持5小时；60min由-15℃升温-10℃，保持5小时；60min由-10℃升温-5℃，保持5小时；60min由-5℃升温0℃，保持220min；

所述二次解析干燥为：40min由0℃升温至30℃，保持500min，控制真空度为0.19bar；30℃保持120min，控制真空度为0.0002bar。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述牛胎盘细胞外泌体由以下方法制备得到：

取健康牛胎盘组织匀浆，-80℃冷冻后反复冻融2-3次；

匀浆液常温解冻后进行第一超声处理，过滤，滤液-80℃冷冻保存；

滤液常温解冻，离心，上清液进行第二超声处理，0.22um微孔滤膜过滤，获得牛胎盘细胞外泌体。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述匀浆为：用PBS缓冲液冲洗牛胎盘，切成小块，置于匀浆机中匀浆；在所述匀浆之前还包括对牛胎盘进行预处理的步骤；所述预处理为：将胎盘除去羊膜和脐带，反复冲洗至除净血液，控干水分。

9.权利要求1～8任一项所述制备方法制得的牛胎盘细胞外泌体冻干粉。

10.如权利要求1～8中任一项所述制备方法制得的牛胎盘细胞外泌体冻干粉或权利要求9所述的牛胎盘细胞外泌体冻干粉在制备抗衰老或修复的化妆品中的应用。