[发明专利]一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉及其制备方法

说明书

本发明涉及护肤品技术领域，尤其涉及一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉及其制备方法。本发明以甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐温、白蛋白和水组成的赋形剂结合本发明制备工艺，制备的牛胎盘细胞外泌体冻干粉具有良好的稳定性和生物学活性，在常温下的能够保存较长时间。实验表明，常温25℃保存6个月后牛胎盘细胞外泌体仍然保持良好的完整性和生物学活性，适用于牛胎盘细胞外泌体的长期保存、运输和应用。

技术领域

本发明涉及护肤品技术领域，尤其涉及一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉及其制备方法。

背景技术

动物胎盘其内含有多种生物活性物质如蛋白质、氨基酸、免疫调节肽、矿物元素、维生素及多种功能因子等，这些活性物质具有调节机体免疫、抗应激、抗氧化等功效,他们使用也有较长的时间和范围，例如牛、羊等动物胎盘制品已收录至《化妆品已使用原料目录》，有水解胎盘(牛)提取物(HYDROLYZED PLACENTAL PROTEIN)，动物胎盘蛋白(PLACENTALPROTEIN)等多种。

胎盘中富含各种类型的干细胞，其分泌的外泌体(exosome)，一种直径在30-150纳米的囊泡，包含有多种类型的核酸和蛋白，可以起到信号传导，免疫调节，营养物质传递的功能，近年来成为美容及科研领域的热点，国内外已应用到化妆品、医疗器械、医学美容、医药等多个领域。越来越多的研究表明，干细胞外泌体能够参与细胞结构的维持运动信息交流以及组织修复与再生，具有较好的抗光老化、抗氧化、抗皱、美白肌肤、伤口愈合、细胞修复等功效。外泌体的这些作用使得其在治疗心肌梗死，皮肤创伤等组织损伤中存在良好的应用前景，并且已经有较多深入的研究。

冻干粉是采用真空冷冻干燥法将物料除去水分后的粉末状固体。真空冷冻干燥法广泛应用于药物生产，主要工艺是在低温度下使物料完全冻结，活性物质与保护剂形成稳定的固体骨架，然后在高真空、温条件下使固态的冰晶直接升华，采用冷凝的方法捕捉升华的水汽，致使物质脱水干燥。冻干粉质地疏松多孔，定量准确，无污染，可避免活性物因高热而分解变质；加注射用水后能迅速恢复原来的特性；同时高真空的环境下活性物不易氧化，有利于产品长期贮存，是药物针剂常用剂型。

在化妆品行业，很多具有生物活性的植物来源或生物工程来源物质在化妆品体系中稳定性差，易降解变质，而真空冷冻干燥技术的广泛发展和普及很好的解决了这个问题，冻干粉类化妆品也应运而生。因为其高度的稳定性和运输、储存、使用的便捷性，随着真空冷冻干燥技术的普及和成本的降低，冻干粉现在已成为化妆品常用形式，通过添加不同活性物质起到不同的护肤功效。

基于动物胎盘的生物活性，多种动物胎盘提取物收录在中国化妆品原料目录和CFDA已使用化妆品原料名称目录。胎盘中分布有大量的间充质干细胞，具有很高的生长及分泌活性。大量临床前试验证明了干细胞分泌的外泌体的安全性，国际上外泌体主要应用于创新治疗皮肤损伤和化妆品，已有含有外泌体的面膜及外用凝胶药物上市。

外泌体转化应用，关键在于生产安全合格的规模化外泌体及其稳定保存。目前针对外泌体设计的冻干方法，虽能一定程度上保存外泌体的活性，但试剂的成份复杂，制备较繁琐，外泌体活性并不稳定，并不利于外泌体产品质量的控制。因此，亟需一种成分简单、能在常温下长期保存外泌体且不影响其活性的冻存保护试剂及方法。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉及其制备方法，该冻干粉具有良好的稳定性和生物学活性，在常温下的能够保存较长时间。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供一种牛胎盘细胞外泌体冻干粉的制备方法，包括以下步骤：

将牛胎盘细胞外泌体与赋形剂混合，得混合液：

将混合液预冻，制冷，抽真空，解析干燥；

所述赋形剂由甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐温、白蛋白和水组成。