[发明专利]火把花烷二倍半萜化合物及其制备方法、药物组合物及应用和火把花总提物的应用

权利要求书

1.火把花烷二倍半萜化合物，其特征在于，为 式1~7、13~17、20和22所示结构中的任意一种：

式1，式2，式3，

式4，式5，式6，

式7，式13，式14，

式15，式16，式17，

式20，式22。

2.权利要求1所述火把花烷二倍半萜化合物的制备方法，具有式1~7、13~17、20和22所示结构化合物依次记为化合物1~7、13~17、20和22，其特征在于，包括以下步骤：

（1）采用有机溶剂对火把花的地上部分进行浸提，得到粗提物；所述有机溶剂为甲醇；

将所述粗提物与水混合，采用乙酸乙酯对所得粗提物水分散液进行萃取，将所得萃取液经减压浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；

将所述乙酸乙酯浸膏进行第一正相硅胶柱层析分离，其中，所用洗脱剂为第一试剂与第二试剂的混合物，所述第一试剂为氯仿，所述第二试剂为丙酮，洗脱方式为梯度洗脱，依次得到6个流份，各流份经减压浓缩依次记为A~F部分；

（2）以甲醇-水为洗脱剂，在梯度洗脱条件下将A部分进行第一大孔树脂柱层析分离，依次得到3个流份，各流份经减压浓缩依次记为Fr.1、Fr.2和Fr.3部分；

将Fr.1部分依次进行第二正相硅胶柱层析分离和第一Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物22；所述第二正相硅胶柱层析分离以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，所述第一Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

以石油醚-氯仿为洗脱剂，将Fr.2部分进行第三正相硅胶柱层析分离，依次得到3个流份，各流份经减压浓缩依次记为Fr.2-1、Fr.2-2和Fr.2-3部分；

以甲醇-水为洗脱剂，在梯度洗脱条件下将Fr.2-1部分进行第二大孔树脂柱层析分离，依次得到4个流份，各流份经减压浓缩依次记为Fr.2-1-1、Fr.2-1-2、Fr.2-1-3和Fr.2-1-4部分；

将Fr.2-1-1部分依次进行第四正相硅胶柱层析分离和第一半制备HPLC纯化，得到化合物14和化合物20；所述第四正相硅胶柱层析分离以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，所述第一半制备HPLC纯化以乙腈-水溶液为流动相；

将Fr.2-1-2部分进行第五正相硅胶柱层析分离，得到化合物15；所述第五正相硅胶柱层析分离以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂；

将Fr.2-1-4部分依次进行第六正相硅胶柱层析分离、第一反相C18柱层析分离和第二Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物13；所述第六正相硅胶柱层析分离以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，所述第一反相C18柱层析分离以甲醇-水洗脱剂，所述第二Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

将Fr.2-2部分依次进行第一MCI反相柱层析分离、第七正相硅胶柱层析分离和第三Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物1；所述第一MCI反相柱层析分离以甲醇-水为洗脱剂，所述第七正相硅胶柱层析分离以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，所述第三Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

以甲醇-水为洗脱剂，在梯度洗脱条件下将Fr.2-3部分进行第二反相C18柱层析分离，依次得到5个流份，各流份经减压浓缩依次记为Fr.2-3-1、Fr.2-3-2、Fr.2-3-3、Fr.2-3-4和Fr.2-3-5部分；

将Fr.2-3-1部分进行第八正相硅胶柱层析分离，得到化合物16；所述第八正相硅胶柱层析分离包括依次进行的两个洗脱阶段，其中第一洗脱阶段以石油醚-丙酮为洗脱剂，第二洗脱阶段以石油醚-乙酸乙酯-乙酸为洗脱剂；

将Fr.2-3-2部分依次进行第九正相硅胶柱层析分离和第四Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物4；所述第九正相硅胶柱层析分离以氯仿-乙酸乙酯为洗脱剂，所述第四Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

将Fr.2-3-4部分依次进行第三反相C18柱层析分离、第十正相硅胶柱层析分离和第五Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物17、化合物6和化合物7；所述第三反相C18柱层析分离以甲醇-水为洗脱剂，所述第十正相硅胶柱层析分离以氯仿和乙酸乙酯为洗脱剂，所述第五Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

（3）将B部分依次进行第三大孔树脂柱层析分离、第十一正相硅胶柱层析分离和第二半制备HPLC纯化，得到化合物3；所述第三大孔树脂柱层析分离以甲醇-水为洗脱剂；所述第十一正相硅胶柱层析分离包括依次进行的两个洗脱阶段，其中，第一洗脱阶段以石油醚-丙酮为洗脱剂，第二洗脱阶段以氯仿-丙酮为洗脱剂；所述第二半制备HPLC纯化以乙腈-水溶液为流动相；

（4）将C部分依次进行第二MCI反相柱层析分离、第十二正相硅胶柱层析分离、第五反相C18柱层析分离、第十三正相硅胶柱层析分离和第六Sephadex LH-20柱层析纯化，得到化合物2和化合物5；所述第二MCI反相柱层析分离以甲醇-水为洗脱剂；所述第十二正相硅胶柱层析分离以氯仿-丙酮为洗脱剂；所述第五反相C18柱层析分离以甲醇-水为洗脱剂；所述第十三正相硅胶柱层析分离包括依次进行的两个洗脱阶段，其中，第一洗脱阶段以石油醚-丙酮为洗脱剂，第二洗脱阶段以氯仿-乙酸乙酯为洗脱剂；所述第六Sephadex LH-20柱层析纯化以丙酮为洗脱剂；

所述步骤（2）、步骤（3）和步骤（4）无时间顺序限定。