[发明专利]一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法

权利要求书

1.一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，其包括：根据血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质的初测浓度，在血浆样本中添加内标物，以使在血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质与内标物的质量比为(0.25～2.5)：1；然后将血浆样本用于液相色谱串联质谱分析。

2.根据权利要求1所述的血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，所述甲氧基肾上腺素类物质的初测浓度通过免疫分析法和高效液相色谱法中的任意一种方法获得；

所述免疫分析法包括：放射免疫法和酶联免疫法；

所述高效液相色谱法包括：高效液相色谱法、高效液相色谱与电化学法，以及液相色谱串联质谱法。

3.根据权利要求1所述的血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，在进行液相色谱串联质谱分析时，所述测定方法还包括采用标准曲线法进行定量，所述标准曲线按照标准溶液与内标溶液的峰面积比为(0.20～0.30)、(0.45～0.55)、(0.70～0.80)、(0.95～1.05)、(1.4～1.6)、(1.9～2.1)和(2.4～2.6)进行制备。

4.根据权利要求3所述的血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，所述标准溶液和内标溶液均通过称量配制法进行配制。

5.根据权利要求1所述的血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，进行所述液相色谱串联质谱分析前，所述测定方法还包括：将加入有内标物的血浆样本经固相萃取后获得洗脱液，吹干复溶后，获得用于液相色谱串联质谱分析的待测样本；

优选地，在进行所述固相萃取前，所述测定方法还包括：将添加有内标物的血浆样本进行蛋白沉淀，将蛋白沉淀后的产物进行离心，将离心后的上清液进行所述固相萃取；

优选地，所述蛋白沉淀后的产物的离心条件为：10000～20000r·min^-1，0～10℃，1～10min；

优选地，血浆样本与蛋白沉淀采用的沉淀剂的添加体积比为1:(2～20)；

优选地，所述沉淀剂选自：50％甲醇七水硫酸锌、乙腈和甲醇中的任意一种；

优选地，所述沉淀剂为甲醇。

6.根据权利要求5所述的血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其特征在于，所述固相萃取包括以下步骤：将所述上清液转移至固相萃取柱中，进行淋洗和洗脱；

优选地，所述淋洗时采用的淋洗液选自：水、乙腈、异丙醇以及15～25mmol/L乙酸铵中的至少一种；

优选地，所述淋洗包括：采用淋洗液1和淋洗液2依次进行淋洗；

其中，所述淋洗液1选自：水和15～25mmol/L乙酸铵中的任意一种；所述淋洗液2选自：乙腈和异丙醇中的任意一种；

优选地，所述淋洗液1为15～25mmol/L乙酸铵，所述淋洗液2为异丙醇；

优选地，所述洗脱时采用的洗脱液选自：乙腈和异丙醇的混合溶液、含1％～3％甲酸的甲醇、含1％～3％甲酸的甲醇-水溶液、含1％～3％甲酸的乙腈，以及含1％～3％甲酸的乙腈-水中的至少一种；

优选地，所述洗脱液为含1～3％甲酸的乙腈-水溶液。