[发明专利]一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法

说明书

本发明公开了一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其包括：根据血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质的初测浓度，在血浆样本中添加内标物，以使在血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质与内标物的质量比为(0.25～2.5)：1；然后将血浆样本用于液相色谱串联质谱分析；本发明建立了一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，为血浆甲氧基肾上腺素类物质的检测提供一种高效、准确、精密和简便的标准比对方法或参考方法，可用于有证参考物质、室间质量评价物质和厂家主校准品等物质赋值，促进血浆甲氧基肾上腺素类物质检测的标准化。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，具体而言，涉及一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法。

背景技术

嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(pheochromocytoma and paraganglioma,PPGL)是分别起源于肾上腺髓质和肾上腺外交感神经链的肿瘤，主要合成和分泌大量儿茶酚胺。PPGL临床症状及体征主要有高血压、头痛、心悸、高代谢状态、高血糖和多汗等。PPGL患者长期高血压易导致严重的心、脑、肾损害或因突发严重高血压而导致危象，危及生命。有研究报道PPGL患病率为30万分之一，其中20％诊断为儿童和青少年。在这些诊断中，嗜铬细胞瘤约占80-85％，患病率为百万分之2-百万分之8，副神经节瘤约占15％，患病率为百万分之0.5。在普通门诊的成人高血压患者中PPGL的患病率为0.2％-0.6％，在儿童高血压患者中估计为1.7％，在肾上腺意外瘤中约占5％，尸检研究估计未诊断的PPGL患病率为0.05-0.1％。PPGL在高血压人群发病率高，未及时治疗可能会危及生命，在早期进行诊断治疗，预后良好，因此早期诊断和治疗PPGL是十分必要的。

PPGL的常规诊疗程序是先通过生化检查来定性诊断，再通过CT、磁共振成像等进行定位诊断，然后进行手术治疗。PPGL通过测定血、尿儿茶酚胺及其代谢物进行定性诊断，根据内分泌学会的指导方针，推荐诊断PPGLs的首选生化检验为血浆游离或尿分馏甲氧基肾上腺素类物质测量。有文献报道血浆游离甲氧基肾上腺素类物质诊断PPGL的敏感度及特异度优于尿分馏甲氧基肾上腺素类物质。血浆游离甲氧基肾上腺素类物质测定为临床诊断PPGL的一线筛查指标，术后血浆游离MNs水平可反映手术效果和早期发现肿瘤转移或复发，因此血浆游离甲氧基肾上腺素类物质检测在PPGL的筛查和诊断中具有重要的临床意义。

目前，甲氧基肾上腺素类物质的检测方法分为免疫分析法和高效液相色谱法两大类，免疫分析法包括放射免疫法(RIA)和酶联免疫法(ELISA)，其中RIA方法存在放射性污染，易受抗原抗体交叉反应影响；ELISA方法存在抗体纯度、非特异性结合和交叉反应等问题；高效液相色谱法、高效液相色谱与电化学法(HPLC-ECD)和液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)，其中HPLC-ECD方法需要耗时的样本准备和长时间的色谱运行，存在众多干扰；LC-MS/MS方法仪器设备昂贵，人员技术要求高，但其分辨率、选择性和灵敏度高。

现有调查计划结果显示血浆甲氧基肾上腺素类物质质谱法检测结果之间存在很大差异，未达到标准化和一致化，需要建立参考系统来推动其检测的标准化进程。目前JCTLM(Joint Committee for traceability in Laboratory Medicine)列表上没有甲氧基肾上腺素类物质检测的参考方法及有证参考物质，甲氧基肾上腺素类物质的参考系统处于空白阶段。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，可作为常规检测方法的标准比对方法或参考方法。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供了一种血浆甲氧基肾上腺素类物质的测定方法，其包括：根据血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质的初测浓度，在血浆样本中加入内标物，以使在血浆样本中甲氧基肾上腺素类物质与内标物的质量为(0.25～2.5)：1；然后将血浆样本用于液相色谱串联质谱分析。

本发明具有以下有益效果：