[发明专利]一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法

权利要求书

1.一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，该方法采用等度洗脱的方法，包括以下步骤：

步骤一：对照品溶液的制备

分别取绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品，加入溶剂，制成绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品溶液，作为储备液，其他不同质量浓度的对照品溶液由储备液稀释得到；

步骤二：供试品溶液的制备

取菊苣粉末，加入溶剂，真空超声处理后过滤，取续滤液，过微孔滤膜，即得供试品溶液；

步骤三：定量分析

取对照品溶液和供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪，进行测定分析。

2.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤一中所述的溶剂为甲醇-0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1-3:1；所制成绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品溶液浓度为0.125-0.25mg/mL。

3.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的菊苣粉末提前过40-60目筛后取5-10g。

4.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的真空超声处理前加入溶剂为甲醇-0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1-3:1；加入用量为250-500mL。

5.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的真空超声处理在真空超声波反应釜内进行，真空度为50-100Pa，超声功率为200-400W，反应釜温度15℃-20℃，超声频率10-20KHz，处理时间为60-75min。

6.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述微孔滤膜孔径为0.22μm。

7.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤三中所述的对照品溶液和供试品溶液用量均为10-20μL。

8.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定条件包括：色谱柱为AmethystC18-H型色谱柱，其规格为250mm×4.6mm，5μm，柱温为25-30℃，紫外检测波长为327±1nm。

9.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定条件还包括：流动相为体积比20:80的乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，流速为1.0mL/min。

10.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定分析时间为20±1min；理论塔板数按绿原酸峰计算不低于3000。