[发明专利]一种覆膜酵母发酵滤液的制备工艺

权利要求书

1.一种覆膜酵母发酵滤液的制备工艺，按照下述步骤制备：

步骤1：配制培养基

配制YPD培养基和覆膜酵母发酵用培养基；

步骤2：发酵培养

(1)菌种活化：

将覆膜酵母冻存菌接种于YPD固体培养基的无菌培养平皿中进行活化；

(2) 制备种子液：

从固体平板上挑取新鲜菌落，重悬至无菌水中，混匀后转接到覆膜酵母发酵培养基中，摇床内28℃、200 rpm培养24 h后；

(3)发酵培养：

将种子液接种于覆膜酵母发酵培养基中进行静置微氧发酵培养，接种后的菌种浓度控制在OD₆₀₀=0.2-1.0，装液量约为40%-70%，密封后静置于28℃培养箱中培养；所述的静置微氧发酵方式为每隔24h 或36h摇动一次，其余时间静置培养；

(4)制备发酵液：

发酵结束后，将上述培养液进行离心处理收集上清液，用2张中速滤纸对上清液进行抽滤处理，并将发酵滤液称重，按照质量百分比添加一定比例的防腐剂，并搅拌分散均匀，将加入防腐剂的上清液进行抽滤，依次经过0.45 μm及0.2μm滤膜，得到最终的可无菌保存的覆膜酵母发酵滤液。

2.根据权利要求1所述的一种覆膜酵母发酵滤液的制备工艺，其特征在于，所述的防腐剂为0.5-1.5%PE9010和2-3%丁二醇。

3.根据权利要求1所述的一种覆膜酵母发酵滤液的制备工艺，其特征在于，所述的接种后的菌种浓度控制在OD₆₀₀=0.3-0.6。