[发明专利]二酰基甘油酰基转移酶(DGA1)多核苷酸,和通过异源DGA1的超量表达增加酵母细胞脂质生产的方法在审
申请号: | 202110290143.0 | 申请日: | 2015-02-24 |
公开(公告)号: | CN113151319A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | E.E.布雷夫诺瓦;A.J.肖四世;E.H.格林哈根 | 申请(专利权)人: | 银杏生物制品公司 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/10;C12N15/81;C12N1/19;C12P7/64;C12R1/645 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 罗文锋;黄希贵 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 二酰基 甘油 转移酶 dga1 多核苷酸 通过 超量 表达 增加 酵母 细胞 生产 方法 | ||
1.一种用于产生重组酵母细胞的方法,所述方法包括步骤:
a)将重组DNA构建物引入酵母细胞中,所述重组DNA构建物包含选自以下的异源多核苷酸:
i.包含SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQID NO:14,SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列或其补体的核酸分子;和
ii.与SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQ IDNO:14,SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列或其补体具有至少80%序列同一性的核酸分子;和
b)表达选自以下的异源多肽:
i.SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:11,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:17中所列的氨基酸序列或其生物活性部分;和
ii.与SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:11,SEQ IDNO:13,SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:17中所列的氨基酸序列或其生物活性部分具有至少80%序列同一性的多肽;和
c)在用于增加脂质产量的条件下培养酵母细胞。
2.权利要求1所述的方法,其中所述酵母细胞是解脂耶氏酵母。
3.权利要求1所述的方法,其中所述多核苷酸选自与SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列具有至少95%序列同一性的核酸分子。
4.权利要求1所述的方法,其中所述多核苷酸选自SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8和SEQ IDNO:10中所列的核苷酸序列。
5.权利要求1所述的方法,其中所述多肽选自与SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:5,SEQ IDNO:7,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:11,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:17中所列的氨基酸序列具有至少95%序列同一性的多肽。
6.权利要求1所述的方法,其中所述多肽选自SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:9中所列的核苷酸序列。
7.一种包含选自以下的异源多核苷酸的分离的宿主细胞:
a)包含SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQID NO:14,SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列或其补体的核酸分子;和
b)包含与SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQID NO:14,SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列或其补体具有至少80%序列同一性的核苷酸序列的核酸分子。
8.权利要求7所述的分离的宿主,其中所述多核苷酸选自与SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:18中所列的核苷酸序列具有至少95%序列同一性的核酸分子。
9.权利要求7所述的分离的宿主细胞,其中所述多核苷酸选自SEQ ID NO:6,SEQ IDNO:8和SEQ ID NO:10中所列的核苷酸序列。
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