[发明专利]细菌菌株、提取物、纳米农药及其应用与制备方法

权利要求书

1.一种纳米农药的制备方法，其特征在于，包括步骤：

提供菌株R64，所述菌株R64的分类命名为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），所述菌株R64的保藏编号为CGMCC No. 21803；

将所述菌株R64进行活化，得到活化后的R64单菌落；

将所述活化后的R64单菌落依次进行发酵、萃取，得到菌株R64的提取物；

将所述菌株R64的提取物与AgNO3溶液混合，进行反应，得到所述纳米农药；

将所述活化后的R64单菌落依次进行发酵、萃取的步骤，具体包括：

在培养基中接种所述活化后的R64单菌落进行摇瓶培养，然后进行发酵，得到菌株R64发酵液；

向所述菌株R64发酵液中，加入乙酸乙酯进行萃取，分液漏斗振荡混匀后静置，放出下层水相，上层有机相倒入蒸馏瓶中，真空旋蒸至乙酸乙酯全部蒸发；

用甲醇洗脱后，用真空离心浓缩机浓缩，得到所述菌株R64的提取物；

所述培养基为SGTYP，所述SGTYP由可溶性淀粉5.0g、葡萄糖5.0g、微生物蛋白胨1g、胰蛋白胨1g、酵母提取物1g、人工海盐17g、蒸馏水1L组成;

将所述菌株R64的提取物与AgNO3溶液混合，进行反应，得到所述纳米农药的步骤，具体包括：

将所述菌株R64的提取物加入到去离子水中，用NaOH调节PH至7，再加入AgNO3溶液至其终浓度为4mM，在避光条件下，加热至60℃，在磁力搅拌器上700rpm搅拌反应60小时；

用0.22μm滤膜过滤、7500rpm离心30min，去除上清后向沉淀中加入等体积的水，7500rpm离心30min，重复三次，得到沉淀；

将所述沉淀转移冻干、称重，用无菌去离子水定容至10mg/ml，得到所述纳米农药。

2.根据权利要求1所述的纳米农药的制备方法，其特征在于，所述将所述菌株R64进行活化的步骤，具体包括：将冻存菌液放入海生菌琼脂培养基中，挑取冻存菌液，用平板划线法划线，在培养箱中培养。

3.一种纳米农药，其特征在于，所述纳米农药由权利要求1-2任一所述的方法制备得到。

4.一种权利要求3所述的纳米农药在制备防治植物病的农药中的应用。