[发明专利]细菌菌株、提取物、纳米农药及其应用与制备方法

说明书

本发明公开细菌菌株、提取物、纳米农药及其应用与制备方法，细菌菌株为来源于红树林的菌株R64，所述菌株R64的分类命名为铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，所述菌株R64保藏编号为CGMCC No.21803。本发明从细菌菌株R64中提取的菌株R64的提取物以及利用菌株R64的提取物合成的纳米农药具有较高的抗菌活性和高效性、并且对环境微生物的毒性较低。同时，本发明的生物制备方法成本低廉、操作简单、相对环保。本发明提供了一种新的天然产物农药的同时，通过制作成纳米农药的方法，降低天然产物农药的环境毒性，并同时增加其抗菌活性和高效性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及细菌菌株、提取物、纳米农药及其应用与制备方法。

背景技术

病原微生物引起的植物病害，尤其是大宗粮食作物上的真菌病害严重威胁农业生产，也一直是制约农产品安全和产量的限制性因素。然而目前大多数作物却缺乏针对植物病原菌的抗性良好的品种，植物病的防治仍然依靠传统的化学防治手段，包括使用农用抗生素、无机铜、有机铜以及噻唑类制剂等。然而，传统化学农药的使用不仅容易导致环境污染和农药残留、对环境微生物的毒性较高等问题，还会促进耐药菌株的产生。

因此，现有技术有待改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供细菌菌株、提取物、纳米农药及其应用与制备方法，旨在解决现有化学农药容易导致环境污染、对环境微生物的毒性较高的问题。

本发明的技术方案如下：

一种细菌菌株，其中，所述细菌菌株为来源于红树林的菌株R64，其分类命名为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，该菌株已于2021年02月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，所述菌株R64的保藏编号为CGMCC No.21803。

一种本发明所述的细菌菌株在制备防治植物病的农药中的应用。

一种菌株R64的提取物，其中，所述菌株R64的提取物由本发明所述的细菌菌株中提取得到。

一种本发明所述的菌株R64的提取物在制备防治植物病的农药中的应用。

一种纳米农药的制备方法，其中，包括步骤：

将本发明所述菌株R64进行活化，得到活化后的R64单菌落；

将所述活化后的R64单菌落依次进行发酵、萃取，得到菌株R64的提取物；

将所述菌株R64的提取物与AgNO₃溶液混合，进行反应，得到所述纳米农药。

可选地，所述将本发明所述菌株R64进行活化的步骤，具体包括：

将菌株R64与甘油混合后，冻存在冰箱中；

将冻存菌液放入海生菌琼脂培养基中，挑取冻存菌液，用平板划线法划线，在培养箱中培养。

可选地，将所述活化后的R64单菌落依次进行发酵、萃取的步骤，具体包括：

在培养基中接种所述活化后的R64单菌落进行摇培，然后进行发酵，得到菌株R64发酵液；

向所述菌株R64发酵液中，加入乙酸乙酯进行萃取，分液漏斗振荡混匀后静置，放出下层水相，上层有机相倒入蒸馏瓶中，真空旋蒸至乙酸乙酯全部蒸发；

用甲醇洗脱后，用真空离心浓缩机浓缩，得到所述菌株R64的提取物。

可选地，将所述菌株R64的提取物与AgNO₃溶液混合，进行反应，得到所述纳米农药的步骤，具体包括：