[发明专利]一种纯化猪轮状病毒的方法及其应用在审
| 申请号： | 202110291568.3 | 申请日： | 2021-03-18 |
| 公开（公告）号： | CN113073087A | 公开（公告）日： | 2021-07-06 |
| 发明（设计）人： | 周明光;张华伟;周飞燕;徐高原;罗修鑫;陈映瑾;余蕾;汤细彪 | 申请（专利权）人： | 武汉科前生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 钱云 |
| 地址： | 430206 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纯化 轮状病毒 方法 及其 应用 | ||
1.一种纯化猪轮状病毒的方法，其特征在于，包括：
取片状载体培养的猪轮状病毒液作为待纯化病毒液；
对所述待纯化病毒液进行膜包浓缩和离子交换层析；
所述膜包浓缩包括如下流程：
使用100～300KD膜包将所述待纯化病毒液浓缩至起始体积的1/5～1/10，后补加缓冲液并浓缩至所述起始体积的1/10～1/20，再次补加缓冲液浓缩至所述起始体积的1/20～1/40。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述100～300KD膜包在使用前经过如下预处理流程：
使用碱溶液对所述100～300KD膜包进行循环灭菌处理，再通过无菌注射水清洗所述100～300KD膜包至pH为6.8～7.2。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括，在所述膜包浓缩后，使用所述起始体积1/20～1/40的缓冲液冲洗膜包，收集洗膜液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述缓冲液为0.01～0.02mol/L的PB溶液。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述离子交换层析的介质为QFocurose 6FF。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述离子交换层析的洗脱液包括：含0.2～0.3mol/L的NaCl的PBS，所述PBS的浓度为0.01～0.02mol/L。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述离子交换层析过程中，pH保持在8.0～8.1，和/或，病毒浓缩液上样的线性流速为50～60cm/h，和/或，压力小于2.5bar。
8.权利要求1-7任一项所述方法在制备用于免疫猪轮状病毒的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物为疫苗。
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