[发明专利]检测KISS1基因突变的方法和引物在审
| 申请号： | 202110292407.6 | 申请日： | 2021-03-18 |
| 公开（公告）号： | CN112852955A | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 牛林梅;刘赵玲;王淑一 | 申请（专利权）人： | 杭州艾迪康医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 黄素萍;徐关寿 |
| 地址： | 310023 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 kiss1 基因突变 方法 引物 | ||
1.检测KISS1基因C242G、417delA、437insT和C487G位点突变的引物，其特征在于，包括：扩增KISS1基因C242G、417delA、437insT和C487G位点的引物，其碱基序列为：
KISS1-F:TGTAAAACGACGGCCAGTAAGGAAGGAAAAGAAGGATAGGAT
KISS1-R:AACAGCTATGACCATGGCCTCTTGAAATCAGCTAACCA。
2.如权利要求1所述的引物，其特征在于，还包括测序引物，其碱基序列为：
M13 F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13 R：AACAGCTATGACCATG。
3.检测KISS1基因C242G、417delA、437insT和C487G位点突变的方法，包括以下步骤：
(1)抽提外周血的基因组DNA；
(2)用PCR扩增步骤1中提取的DNA；
(3)对步骤2中的扩增产物进行测序；
(4)对测序结果进行判断，确定C242G、417delA、437insT和C487G位点是否发生突变；
其中，步骤(2)PCR扩增引物碱基序列为：
KISS1-F:TGTAAAACGACGGCCAGTAAGGAAGGAAAAGAAGGATAGGAT
KISS1-R:AACAGCTATGACCATGGCCTCTTGAAATCAGCTAACCA
步骤(3)测序引物碱基序列为：
M13 F：TGTAAAACGACGGCCAGT
M13 R：AACAGCTATGACCATG。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，PCR扩增步骤采用Touch-down PCR技术。
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