[发明专利]一种大米降压肽及其酶解制备方法有效
申请号: | 202110297112.8 | 申请日: | 2021-03-19 |
公开(公告)号: | CN112940079B | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 孟航 | 申请(专利权)人: | 广州明创生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C12P21/06;C12P21/02;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/36;A61K38/10;A61P9/12;A61P39/06 |
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地址: | 510000 广东省广州市黄埔*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大米 降压 及其 制备 方法 | ||
1.一种大米降压肽,其特征在于,
所述的大米降压肽的氨基酸序列为ACHHQENYGNPTV;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,包括以下步骤:
(1)预处理:筛选和清洗大米;
(2)碾碎处理:选择步骤(1)预处理后的大米,转移至碾碎机中进行低温碾碎,得到碎米粒;
(3)酶解处理:选择步骤(2)得到的碎米粒,转移至料液槽中进行浸泡处理,边搅拌边加热;
(4)离心和超滤处理:选择步骤(3)酶解处理后的料液,进行高速离心,离心后取上清液,然后将上清液进行超滤,得到滤液;
(5)吸附处理:选择步骤(4)得到的滤液,并选择大孔吸附树脂进行降压肽的吸附,然后将降压肽用生理盐水洗脱下来;
(6)真空冷冻干燥处理:选择步骤(5)吸附处理后的降压肽,转移到真空冷冻干燥设备中,最后收集粉末状降压肽,并在超低温冰箱-80℃下保藏,即可;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(1)中大米的筛选标准为表面无杂质、无霉腐坏点、无机械损伤的大米;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(1)中大米的清洗步骤为用清水清洗干净并在阴凉处晾干;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(2)中的碎米粒的粒径范围为0.1mm-0.5mm;
步骤(2)中低温碾碎的温度为4℃-6℃;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,
步骤(3)中搅拌的速度为400r/min;
步骤(3)中搅拌的温度为37℃;
步骤(3)中搅拌的时间为40min;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(3)中料液槽内的溶液为含碱性蛋白酶、胰蛋白酶及柠檬酸钠的磷酸盐缓冲液;其中磷酸盐缓冲液为含磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾的溶液,其中磷酸二氢钾的质量浓度为0.35g/L,其中磷酸氢二钠的质量浓度为1.30g/L,其中氯化钠的质量浓度为10.0g/L,其中氯化钾的质量浓度为0.1g/L;其中碱性蛋白酶的质量浓度为10mg/L,其中胰蛋白酶的质量浓度为15mg/L;其中柠檬酸钠的质量浓度为20mg/L;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(4)中高速离心的离心力为7000g,其中高速离心的时间为1h,其中高速离心的温度为4℃;
步骤(4)中超滤的步骤如下:
选择5kDa的超滤膜进行第一次过滤,洗脱液为生理盐水;
选择3kDa的超滤膜进行第二次过滤,洗脱液为生理盐水;
选择1kDa的超滤膜进行第三次过滤,洗脱液为生理盐水;
收集分子量小于1kDa的过滤液;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(5)中大孔吸附树脂的骨架选自二乙烯苯与丙烯酰胺的混合物,其中二乙烯苯与丙烯酰胺的用量比为2:3;
步骤(5)中大孔吸附树脂的上样流速为0.5mL/min;
步骤(5)中大孔吸附树脂的解吸剂为75%乙醇;
如上述所述的大米降压肽的酶解制备方法,步骤(6)中真空冷冻干燥的最低温度控制在-40℃。
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