[发明专利]一种斑马鱼骨质疏松模型的构建方法

权利要求书

1.一种斑马鱼骨质疏松模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将性成熟的斑马鱼按雌雄比＝1∶1.5～2.5的比例放入交配鱼缸内，插上隔板，雌雄斑马鱼分开；培养10～20小时后，取出隔板，待90～150分钟后收集鱼卵；

2)收集到的鱼卵置于含有抑菌素的培养液中，恒温孵育；

3)恒温孵育后将鱼卵随机分为空白对照组和醋酸铅组，空白对照组中加入含有抑菌素的培养液，醋酸铅组中加入含有抑菌素的培养液和醋酸铅溶液，进行恒温培养；其中，醋酸铅组中醋酸铅的终浓度为5～20mg/L；

4)取步骤3)培养后的斑马鱼进行软骨染色，与空白对照组相比，若醋酸铅组的染色区域减小，则得到斑马鱼骨质疏松模型。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在步骤3)中，恒温培养的温度为28～29℃。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在步骤3)中，恒温培养的时间为8～10天，每天更换培养液。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在步骤3)中，在培养过程中，每天以13～15小时光照/9～11小时黑暗处理。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在步骤2)中，恒温孵育的温度为28～29℃。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在步骤2)中，恒温孵育的时间为1～3小时。

7.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述的培养液为养鱼水。

8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述的养鱼水的参数条件为：酸碱度：7.0～7.3；温度：27～29℃；电导率：450～550μs；盐度：0.25～0.75‰；溶氧度：≧6mg/L；光周期：14/10小时；硬度：100～200mg/L；氯：0mg/L；氨氮浓度：0.02mg/L；亚硝酸盐：1mg/L；硝酸盐：50mg/L；二氧化碳：50mg/L。

9.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，在含有抑菌素的培养液中，抑菌素的浓度为0.5×10-5μg/L。

10.一种权利要求1～9所述方法构建得到的斑马鱼骨质疏松模型。