[发明专利]一种基于保护剂的精子冷冻保存方法有效
申请号: | 202110299450.5 | 申请日: | 2021-03-22 |
公开(公告)号: | CN113040132B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
发明(设计)人: | 高慧;李奎;秦啼;王争光;董信阳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人: | 杜放 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 保护 精子 冷冻 保存 方法 | ||
1.一种基于保护剂的精子冷冻保存方法,其特征在于:包括以下步骤:
a)使用稀少精子冷冻保护剂稀释精液样本,所述的稀少精子冷冻保护剂与精液的体积比为1∶(1-2);
b)将精液-稀少精子冷冻保护剂混合物放置在室温下作用最少5分钟;
c)将精液-稀少精子冷冻保护剂混合物装入保存试管中在液氮面上熏蒸10分钟;
d)将载有保存试管的支架转移到-196℃液氮存储罐中保存;
其中,d)中所述的液氮存储罐包括罐体(1)、设于所述罐体(1)壁的第一真空层(11)、固定连接于所述罐体底部的支撑脚(12)、设于所述罐体(1)内部的冷冻仓(13)、设于所述罐体(1)上部的安装口(14)、滑动连接于所述安装口(14)的冷冻架(2)、设于所述冷冻架(2)的安全扣件(3)、设于所述冷冻架(2)上的升降装置(4)、设于所述冷冻架(2)上的夹持装置(5)和设于所述冷冻架(2)上的两轴坐标定位装置(6);
所述安全扣件(3)包括固定连接于所述罐体(1)的多个挤压块(31)、设于所述挤压块(31)上的挤压斜面(32)、固定连接于所述冷冻架(2)上部的安全块(33)、设于所述安全块(33)的槽口(34)、设于所述槽口(34)的防滑槽(35)、滑动连接于所述防滑槽(35)的防滑板(36)、设于所述防滑板(36)下部的安全弹簧(37);将收集精液进行检查后封存在冷冻试管中,将冷冻试管夹持在冷冻架上,并记录对应位置信息,液氮会将冷冻架上的冷冻试管淹没;旋转冷冻架上部,使得挤压块与安全块的槽口扣合,在安全弹簧的作用下,防滑板挤压挤压块,使得挤压块无法后移脱开槽口;
所述夹持装置(5)包括设于所述冷冻架(2)上的夹持仓(51)、固定连接于所述夹持仓(51)的多个夹持环(52)、设于所述夹持环(52)上的多个夹持口(53)、设于所述夹持环(52)上的释放槽(54)、可转动连接于所述释放槽(54)的安全环(55)、滑动连接于所述安全环(55)的多个试管(56)、可拆列连接于所述试管(56)的密封塞(57)、固定连接于所述试管(56)的挡边法兰(58)和设于所述安全环(55)上的下料口(59);所述升降装置(4)包括固定连接于所述罐体(1)底部的配重块(41)、固定连接于所述配重块(41)的导向柱(42)、设于所述冷冻架(2)上的压力仓(43)和设于所述冷冻架(2)上部的气压泵(44);所述导向柱(42)在所述压力仓(43)内滑动;所述压力仓(43)外侧设有隔热层;将冷冻试管通过夹持口安装在夹持环上,挡边法兰与夹持环的上表面相接触,旋转安全环,使得安全环上的下料口与夹持口相互错位,试管被固定。
2.根据权利要求1所述的一种基于保护剂的精子冷冻保存方法,其特征在于:所述两轴坐标定位装置(6)包括角坐标定位装置(61)和Z轴坐标定位装置(62);所述角坐标定位装置(61)包括固定连接于所述冷冻架(2)的控制台(611)、可转动连接于所述控制台(611)的多个控制臂(612)、套设于所述控制臂(612)且滑动连接于所述释放槽(54)的控制小齿轮(613)、设于所述安全环(55)内壁的环形齿(614)、设于所述控制小齿轮(613)的十字槽(615)、固定连接于所述控制臂(612)的第一十字盘(616)、滑动连接于所述控制臂(612)上部的坐标小齿轮(617)、可转动连接于所述冷冻架(2)上部的角坐标控制盘(618)、设于所述角坐标控制盘(618)的角坐标齿轮(619);所述角坐标控制盘(618)上表面刻有角坐标;旋转角坐标控制盘至对应的角坐标,角坐标控制盘带动控制小齿轮转动,控制臂旋转,第一十字盘与十字槽扣合,控制臂带动坐标小齿轮转动,坐标小齿轮通过与环形齿的啮合带动安全环旋转,下料口位置移动,下料口移动到对应的冷冻试管的夹持口处,气压泵启动,气压仓内的气压增加,冷冻架沿着导向柱平稳上升,直至所有冷冻试管全部露出罐口,操作人员可将对应试管取下,冷冻架下沉进入液氮罐中。
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