[发明专利]一种NK细胞活性快速检测方法及系统

说明书

本发明公开了一种NK细胞活性快速检测方法及系统，利用NK细胞主动聚集到靶细胞附近进行杀伤的特点，通过图像处理方法快速的进行光学识别，由靶细胞液一开始滴入免疫细胞样本中初期靶细胞液进行扩散导致其在细胞活性图像中对应的第一连通区域逐渐变大，随着免疫细胞样本中的NK细胞被靶细胞所吸引聚集，大量杀伤靶细胞，导致后期靶细胞液在细胞活性图像中对应的第一连通区域的面积逐渐缩小，并对此根据显微图像进行分析，根据分析结果对NK细胞的杀伤效力进行评价检测，即使在NK细胞数量基数大的时候，也不会提高检测算法的时空复杂度，检测精度高，能够满足快速、准确检测的要求，快速检测得到NK细胞活性的结果。

技术领域

本公开属于计算机图像处理技术、细胞活性检测计算技术领域，具体涉及一种NK细胞活性快速检测方法及系统。

背景技术

由于NK细胞(自然杀伤细胞)是机体内重要的免疫细胞，在免疫系统在的淋巴细胞中占比很大，NK细胞在形态上属于大颗粒淋巴细胞，其在血液中或者淋巴液中的杀伤活力大，目前一般是通过流式细胞法对通过荧光剂染色后的NK细胞进行筛选与计数，以荧光的亮度进行测量细胞的量，但是其测量所需的时间漫长，精度低，目前针对NK细胞的活性或者杀伤性检测一般通过加入靶细胞后用显微镜进行人工检测，难以客观的判断NK细胞的活性和杀伤力，无法量化，无法向诊断者提供最直接、清楚、及时和准确的诊断图像及意见，目前的NK细胞的计算机自动识别方法，例如申请号CN202011176203.8的一种体外自然杀伤细胞免疫活性的评价方法,对显微图像中同一区域的细胞进行识别并分析，根据分析结果评估所述自然杀伤细胞的免疫活性，该方法由图像直接得到细胞死亡率、细胞自伤率以及细胞特异杀伤率等多项数据；申请号CN202011173498.3的一种基于细胞直径评价细胞杀伤效力的方法通过图像识别对所述显微图像中的细胞进行识别，采集细胞的尺寸信息和颜色信息，并对所得信息进行分析，根据分析结果对效应细胞的细胞杀伤效力进行评价，这两种方式在少量的NK细胞时效果尚佳，但是在大量的NK细胞同时分辨时，时间复杂度和空间复杂的剧增，检测速度慢，并且精度很低，无法满足快速、准确检测的要求。

发明内容

本发明的目的在于提出一种NK细胞活性快速检测方法，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。

为了实现上述目的，根据本公开的一方面，提供一种NK细胞活性快速检测方法，所述方法包括以下步骤：

S100，对免疫细胞样本进行染色；

进一步地，在S100中，对免疫细胞样本进行染色的方法为：利用荧光染料对血液样本进行染色(增强细胞在图像中的对比度)，并加入红细胞裂解液或者溶血剂进行溶血去处红细胞得到免疫细胞样本，最终实现了对免疫细胞样本进行染色，所述荧光染料为DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)、异硫氰酸荧光素、增强型荧光蛋白、7-氨基放线菌素D中任意一种。

S200，在免疫细胞样本中的任意一个位置滴入靶细胞液(一般为免疫细胞样本的中心位置),记放入靶细胞液的中心位置为L点；

进一步地，在S200中，所述靶细胞液中的靶细胞通过瞬时转染使靶细胞特异性表达绿色荧光蛋白；靶细胞液的滴入量为免疫细胞样本量的20分之一，例如免疫细胞样本2ml，靶细胞液约为100μl。

进一步地，在S200中，所述靶细胞液中的靶细胞包括：K-562细胞、海拉细胞或肿瘤细胞、病毒感染细胞、某些非自身组织细胞(如非自身的血细胞)、寄生虫中任意一种。

S300，每间隔时间T采集免疫细胞样本的显微图像或CCD图像作为细胞活性图像；其中，T的取值范围为[10,300]秒；

其中，显微图像为通过光学显微镜拍摄的免疫细胞样本表面图像；

CCD图像为通过面阵CCD工业相机采集的免疫细胞样本表面的图像。