[发明专利]一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的荧光剂与方法

权利要求书

1.一种用于快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的荧光剂，其特征在于，其为吡啶并吡嗪酮离子型化合物，化学结构式如下：

式(I)中的阴离子X是I、Br或Cl。

2.一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、将0.2mL不同浓度氨基甲酸酯类农药溶液分别与0.1mL乙酰胆碱酯酶溶液、0.5mL显色剂溶液、0.17mL去离子水混合，分别得到0.97mL不同浓度氨基甲酸酯类农药的混合溶液A，水浴15min；显色剂是指权利要求1所述的吡啶并吡嗪酮离子型化合物；

步骤2、在每份不同浓度氨基甲酸酯类农药的混合溶液A中分别加入0.03mL碘化硫代乙酰胆碱溶液得到含有不同浓度氨基甲酸酯类农药、乙酰胆碱酯酶、显色剂与碘化硫代乙酰胆碱的样品B，水浴反应5min；

步骤3、在430nm激发波长下测定每份样品B荧光光谱，将最大发射波长、最大发射光强分别与其对应氨基甲酸酯类农药的浓度进行线性拟合，可构建氨基甲酸酯类农药检测的标准浓度曲线；

步骤4、通过365nm紫外波长照射观察每份样品B荧光颜色变化，判断体系荧光变色时氨基甲酸酯类农药水溶液浓度，记作荧光突变阈值；

步骤5、对过滤后待测样品取样0.2mL与0.1mL乙酰胆碱酯酶溶液、0.5mL显色剂溶液、0.17mL去离子水混合，得到0.97mL混合溶液C，水浴15min；

步骤6、混合溶液C加入0.03mL碘化硫代乙酰胆碱溶液得到样品D，水浴反应5min；

步骤7、用荧光光谱仪在430nm激发波长下测定每份样品D荧光光谱，对照步骤3中氨基甲酸酯类农药检测的标准浓度曲线可得出农残浓度；在365nm紫外灯下观察样品D荧光，若样品荧光为绿色，则可判断溶液D中氨基甲酸酯类农药浓度超过阈值；若样品荧光为蓝色，则可判断溶液D中氨基甲酸酯类农药浓度低于阈值。

3.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，所述的氨基甲酸酯类农药为甲萘威、抗蚜威、异丙威、速灭威、残杀威、仲丁威、克百威、西维因、甜菜安、甜菜宁、丁硫克百威或丙硫克百威中的一种或二种以上。

4.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，步骤1中所述的氨基甲酸酯类农药保存于去离子水中浓度为25ppm；

步骤1中所述的显色剂溶液保存于一定浓度pH＝7的磷酸二氢钠-磷酸一氢钠缓冲溶液中，浓度为1μM～10mM；

步骤1中所述的乙酰胆碱酯酶溶液保存于一定浓度pH＝7的磷酸二氢钠-磷酸一氢钠缓冲溶液中，浓度为0.05U/mL～20U/mL；

pH＝7的磷酸二氢钠-磷酸一氢钠缓冲溶液浓度为0.1mM～1M。

5.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，样品B中不同浓度的氨基甲酸酯类农药浓度分别为0、0.0000128ppm、0.000064ppm、0.00032ppm、0.0016ppm、0.008ppm、0.04ppm、0.2ppm、1ppm、5ppm。

6.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，步骤2中所述的碘化硫代乙酰胆碱溶液存储于去离子水中，浓度为300μM～300mM。

7.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，步骤5所述待测样品为河水、湖水、自来水、或井水；

步骤5中所述的乙酰胆碱酯酶溶液的浓度为0.05U/mL～2U/mL；

步骤5中所述显色剂溶液的浓度为1μM～10mM。

8.根据权利要求2所述的一种快速可视化检测氨基甲酸酯类农残的方法，其特征在于，步骤6中所述的碘化硫代乙酰胆碱溶液存储于去离子水中，浓度为300μM～300mM。