[发明专利]一种梦香文心兰的组织培养方法

说明书

本申请涉及植物组织培养的技术领域，具体公开了一种梦香文心兰的组织培养方法。包括以下步骤：S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于酒精中浸泡，捞出后切取茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养，得到原球茎；控制培养温度和湿度，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射；S2、将原球茎转入增殖培养基中培养，得到幼芽；控制培养温度和湿度，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射；S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6‑8cm长，得到高芽苗；控制培养温度和湿度，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射。本申请的方法能够提高对文心兰组培的成功率。

技术领域

本申请涉及植物组织培养的技术领域，更具体地说，它涉及一种梦香文心兰的组织培养方法。

背景技术

文心兰属兰科文心兰属，又名瘤唇兰属，全属由原生种400多个。它花小而繁多，颜色艳丽多彩，形态变化多样，花朵连续不断开放，可持续1-3个月，是上等的盆栽观赏和切花材料。

文心兰传统的分株繁殖速度慢，一年仅2-3个芽，繁殖系数低。通过组培技术，可加快繁殖速度，进行工厂化生产。文心兰组织培养，一方面可以扩大其繁殖系数，从而实现规模化繁殖；另一方面，可以在保持其原有的优良性状的基础上，实现文心兰的种质资源保存和转基因研究等。文心兰组织培养的成本主要包括组培苗生产所需的培养基、设施设备、供电成本、耗材和人工成本。

常规的文心兰组织培养方法为，选取文心兰基部萌发的嫩芽作为外植体，用70％酒精进行表面消毒，灭菌后用无菌水洗净，切成1-1.5mm厚的茎尖薄片，接种在准备的培养基上，保持温度在24-28℃之间，光照强度500Lux，照射16h，在MS培养基中添加1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤的培养基上，将形成的原球茎继续在增殖培养基中采用固体培养，20多天后原球茎顶端形成芽，在芽基部分分化根。约100天后，分化出的植株长出叶片，成为完整幼苗。

然而常规的文心兰组培方法，对文心兰进行组培的成功率不高，难以大规模加快文心兰的繁育速度。

发明内容

为了提高对文心兰组培的成功率，本申请提供一种梦香文心兰的组织培养方法及培养基。

本申请提供一种梦香文心兰的组织培养方法，采用如下的技术方案：

一种梦香文心兰的组织培养方法，包括以下步骤：

S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70-75％的酒精中浸泡30-40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养25-27天，得到原球茎；控制培养温度25-27℃，湿度70-75％，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射，照射时长10-12小时/天；

S2、将原球茎转入增殖培养基中培养28-30天，得到幼芽；控制培养温度25-27℃，湿度75-80％，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，照射时长14-16小时/天；

S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6-8cm长，得到高芽苗；控制培养温度24-26℃，湿度70-75％，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射，照射时长14-16小时/天。

通过采用上述技术方案，在S1中，将从幼芽上切除的顶芽置于酒精中，以对顶芽进行消毒，减少顶芽携带的细菌等杂质对后续培养造成影响，消毒后切取顶芽上的芽尖进行诱导培养，从而对其进行诱导培养，在诱导培养期间，使用LED光对茎尖进行照射，促进茎尖的培养；在S2中，将S1对茎尖诱导培养出的原球茎转移至增殖培养基中，对原球茎进行增殖培养，在增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，促进原球茎的增殖分化得到幼芽；在S3中，将幼芽转接入壮苗培养基中，使得幼苗在壮苗培养基中生长，直至得到高芽苗，在幼苗的生长期间，使用LED光对幼苗进行照射，促进幼苗的生长。