[发明专利]一种构巢曲霉自诱导型表达系统及其应用

权利要求书

1.一种构巢曲霉自诱导表达系统，其特征在于，所述表达系统包括表达载体和宿主细胞；所述表达载体为过表达了鸟氨酸氨甲酰基转移酶的pUC19质粒，所述表达载体还含有P_niaD启动子过表达目的基因，所述P_niaD启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的构巢曲霉自诱导表达系统，其特征在于，所述鸟氨酸氨甲酰基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.如权利要求1或2所述的构巢曲霉自诱导表达系统，其特征在于，所述宿主细胞为构巢曲霉ABPU1。

4.如权利要求1～3任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统，其特征在于，所述目的基因包括但不限于：葡萄糖醛缩酶、过氧化氢酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶。

5.如权利要求1～4任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统，其特征在于，所述表达载体中的目的基因和鸟氨酸氨甲酰基转移酶之间连接有终止子TtrpC。

6.一种采用构巢曲霉生产目标蛋白的方法，其特征在于，将连接了目标蛋白的权利要求1～5任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统划线至种子培养基中进行培养，制备得到种子液，将种子液添加至含有诱导剂的发酵培养基中，发酵生产目标蛋白。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述诱导剂为NH₄⁺和或NO₃^-。

8.如权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中需同时添加尿苷、L吡哆醇及生物素。

9.如权利要求6～8任一所述的方法，其特征在于，所述种子液的制备方法为：将所述构巢曲霉自诱导表达系统划线至种子培养基中进行培养，制备得到孢子，采用孢悬液清洗孢子，静置，取上层游离孢子，制备得到种子液。

10.权利要求1～5任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统，或权利要求6～9任一所述的方法在蛋白表达中的应用。