[发明专利]抑瘤素M联合脂多糖诱导的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型、制法以及应用有效
| 申请号： | 202110309095.5 | 申请日： | 2021-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN113046301B | 公开（公告）日： | 2023-01-31 |
| 发明（设计）人： | 谢文娟;张晓鸥;毛华;李芬;郭学平 | 申请（专利权）人： | 华熙生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京唐颂永信知识产权代理有限公司 11755 | 代理人： | 刘伟;任玮静 |
| 地址： | 250101 山东省济*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抑瘤素 联合 多糖 诱导 粘膜 上皮细胞 炎症 模型 制法 以及 应用 | ||
1.一种抑瘤素M联合脂多糖诱导的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，所述模型通过包含下述步骤的方法制备：
将人鼻粘膜上皮细胞接种在培养基中进行培养得到贴壁生长的人鼻粘膜上皮细胞；
更换所述培养基，并加入抑瘤素M培养所述贴壁生长的人鼻粘膜上皮细胞，然后再加入脂多糖进行培养得到人鼻粘膜上皮细胞炎症模型；
所述抑瘤素M的浓度为10ng/ml；
所述脂多糖的浓度为10-100μg/ml；
加入抑瘤素M后培养时间为6-24h；
加入脂多糖后培养时间为12-24h。
2.根据权利要求1所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，所述人鼻粘膜上皮细胞为永生化人鼻粘膜上皮细胞。
3.根据权利要求1所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，所述培养基为加入胎牛血清的MEM培养基。
4.根据权利要求3所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，所述胎牛血清的浓度为10-15wt%。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，加入抑瘤素M后培养时间为6-12h。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，所述脂多糖的浓度为80-100μg/ml。
7.根据权利要求1-4中任一项所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型，其中，加入脂多糖后培养时间为24h。
8.一种人鼻粘膜上皮细胞炎症模型的制备方法，其包括下述步骤：
将人鼻粘膜上皮细胞接种在培养基中进行培养得到贴壁生长的人鼻粘膜上皮细胞；
更换所述培养基，并加入抑瘤素M培养所述贴壁生长的人鼻粘膜上皮细胞，然后再加入脂多糖进行培养得到人鼻粘膜上皮细胞炎症模型；
所述抑瘤素M的浓度为10ng/ml；
所述脂多糖的浓度为10-100μg/ml；
加入抑瘤素M后培养时间为6-24h；
加入脂多糖后培养时间为12-24h。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其中，所述人鼻粘膜上皮细胞为永生化人鼻粘膜上皮细胞。
10.根据权利要求8所述的制备方法，其中，所述培养基为加入胎牛血清的MEM培养基。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其中，所述胎牛血清的浓度为10-15wt%。
12.根据权利要求8-11中任一项所述的制备方法，其中，加入抑瘤素M后培养时间为6-12h。
13.根据权利要求8-11中任一项所述的制备方法，其中，所述脂多糖的浓度为80-100μg/ml。
14.根据权利要求8-11中任一项所述的制备方法，其中，加入脂多糖后培养时间为24h。
15.一种筛选慢性鼻炎药物的方法，包括使用权利要求1-7中任一项所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型或者权利要求8-14中任一项所述的制备方法制备得到的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型对药物进行筛选以得到慢性鼻炎药物。
16.一种评价慢性鼻炎药物治疗功效或作用机制的方法，包括使用权利要求1-7中任一项所述的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型或者权利要求8-14中任一项所述的制备方法制备得到的人鼻粘膜上皮细胞炎症模型对慢性鼻炎药物进行评价。
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