[发明专利]一种农药残留快速检测的定量表达方法

权利要求书

1.一种农药残留快速检测的定量表达方法，所述农药残留为有机磷、氨基甲酸酯类农药，其特征在于：具体步骤如下：

步骤一、试样前处理制备；

步骤二、空白样品荧光值测定ΔF₀，空白样品反应12min荧光的变化值；

步骤三、待测液荧光值测定ΔF_t，待测样品反应12min荧光的变化值；

步骤四、根据抑制率标定标准曲线抑制率，抑制率(％)＝[(ΔF₀-ΔF_t)/ΔF₀]×100；

步骤五、根据抑制率与农药的浓度对数成线性关系，推算农药残留浓度。

2.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测的定量表达方法，其特征在于：步骤一中试样前处理制备包括固体式样或者液体式样，其中：

固体式样制备方式如下：

将谷物、水产品、茶叶、咖啡等磨碎，或蔬菜、水果的可食用部分，尽量取整块，称取0.30g放入2.0mL离心管，加入1500μL专用萃取剂D，在震荡混合器萃取10min，如萃取液浑浊，需离心分离，得到萃取清液，待测；

液体式样制备方式如下：

1)、清澈液体样品可直接检测；

2)、含固体浑浊液体样品，需先离心分离出清澈液体后，再检测；

3)、颜色较深液体样品，需先过滤等方法脱色后，再检测。

3.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测的定量表达方法，其特征在于：步骤二中空白样品荧光值测定ΔF₀，空白样品反应12min荧光的变化值测定方法、以及步骤三中待测液荧光值测定ΔF_t，待测样品反应12min荧光的变化值测定方法，包括：

a、空白测试：向2.0mL离心管加入500μL萃取剂D，再加入30μL酶剂，在25～30℃室温下，预孵反应7min；

b、向2.0mL离心管加入500μL上述前处理制备的待测萃取剂磷酸盐缓冲溶液，PH值为6～7.5，再加入30μL酶剂，在25～30℃室温下，预孵反应5～7min；

c、取n+1个比色皿试剂盒，第一个比色皿作为空白酶活性检测，加入20～60μL荧光探针溶液，震荡3min以上，使显色剂充分溶解；

d、取预孵溶液300μL，加入比色皿，在25～30℃下，震荡反应12min；

e、向比色皿加入200μL终止剂乙腈，混匀，待测。

4.根据权利要求3所述的一种农药残留快速检测的定量表达方法，其特征在于：所述荧光探针为以下化合物：

4-位可以是CF₃，也可以是硝基、乙酰基，5-位可以是乙酰基或氢原子。

5.根据权利要求3所述的一种农药残留快速检测的定量表达方法，其特征在于：所述酶剂可以是乙酰胆碱酯酶，也可以是丁酰胆碱酯酶。

6.根据权利要求3所述的一种农药残留快速检测的定量表达方法，其特征在于：所述荧光探针的浓度为1～20mM，优选于10mM。