[发明专利]一种农药残留快速检测的定量表达方法

说明书

本发明公开了一种农药残留快速检测的定量表达方法，所述农药残留为有机磷、氨基甲酸酯类农药，具体步骤如下：步骤一、试样前处理制备；步骤二、空白样品荧光值测定ΔF₀，空白样品反应12min荧光的变化值；步骤三、待测液荧光值测定ΔF_t，待测样品反应12min荧光的变化值；步骤四、根据抑制率标定标准曲线抑制率，抑制率(％)＝[(ΔF₀‑ΔF_t)/ΔF₀]×100；步骤五、根据待测液抑制率，推算农药残留浓度。该方法通过在荧光条件下读取农药残留的酶抑制率，不仅可以实现农药残留的定性判读，检出限也更低，配合农药对酶抑制率的曲线能够推算出农残的含量，可以定量的显示农药超标的程度，提高检测精度，计算结果可以形象的表达。

技术领域

本发明方法涉及用于食用农产品的快速检测，属于生物技术领域，具体为一种农药残留快速检测的定量表达方法。

背景技术

现在普通的农药残留(有机磷、氨基甲酸酯类)快速检测方法通常是用可见光下酶抑制率法来表示农药残留是否超标，超过50％的为阳性，小于50％的为阴性；此种判定方式比较抽象也不能定量的显示农药超标的程度，即只能定性不能定量或半定量；此判定方式灵敏度较低，不能检测较低含量的有机磷、氨基甲酸酯类农药残留。

我们采用的胆碱酯酶可催化专一选择性的荧光探针水解，水解产物在一定波长的激发光照射下发射特定波长的荧光，在一定范围内，荧光强度值与胆碱酯酶的活性成正比。氨基甲酸酯和有机磷类农药对胆碱酯酶活性有抑制作用，酶与样品作用后，再利用荧光探针检测酶的残余活性，从而推算出农残的含量。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种农药残留快速检测的定量表达方法，通过在荧光条件下读取农药残留的酶抑制率，不仅可以实现农药残留的定性判读，检出限也更低，配合农药对酶抑制率的曲线能够推算出农残的含量，可以定量的显示农药超标的程度，提高检测精度，计算结果可以形象的表达，本发明提供如下技术方案：

一种农药残留快速检测的定量表达方法，所述农药残留为有机磷、氨基甲酸酯类农药，具体步骤如下：

步骤一、试样前处理制备；

步骤二、空白样品荧光值测定ΔF₀，空白样品反应12min荧光的变化值；

步骤三、待测液荧光值测定ΔF_t，待测样品反应12min荧光的变化值；

步骤四、根据抑制率标定标准曲线抑制率，抑制率(％)＝[(ΔF₀-ΔF_t)/ΔF₀]×100；

步骤五、根据抑制率与农药的浓度对数成线性关系，推算农药残留浓度。

优选的，步骤一中试样前处理制备包括固体式样或者液体式样，其中：

固体式样制备方式如下：

将谷物、水产品、茶叶、咖啡等磨碎，或蔬菜、水果的可食用部分，尽量取整块，称取0.30g放入2.0mL离心管，加入1500μL专用萃取剂D，在震荡混合器萃取10min，如萃取液浑浊，需离心分离，得到萃取清液，待测；

液体式样制备方式如下：

1)、清澈液体样品可直接检测；

2)、含固体浑浊液体样品，需先离心分离出清澈液体后，再检测；

3)、颜色较深液体样品，需先过滤等方法脱色后，再检测。

优选的，步骤二中空白样品荧光值测定ΔF₀，空白样品反应12min荧光的变化值测定方法、以及步骤三中待测液荧光值测定ΔF_t，待测样品反应12min荧光的变化值测定方法，包括：