[发明专利]柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其专用引物和应用

权利要求书

1.柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因的专用引物，其特征在于，所述的内参基因包括柳杉干旱胁迫下miRNA荧光定量内参基因novel16、U6和pab-miR159a基因；柳杉热害胁迫下miRNA荧光定量内参基因novel1和novel16基因；柳杉低温胁迫下miRNA荧光定量内参基因cln-miR6725和novel16基因；柳杉盐胁迫下miRNA荧光定量内参基因novel16、cln-miR6725、pab-miR395b和5SrRNA基因；所述novel16基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .1所示；所述pab-miR159a基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .2所示；所述novel1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .3所示；所述cln-miR6725基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .4所示；所述pab-miR395b基因的核苷酸序列如SEQID NO .5所示；所述5SrRNA基因的核苷酸序列如SEQID NO .6所示；

所述novel16基因的引物序列如下：

novel16正向引物：5’-GCGTTTTTCCAATACCTCCTATACC-3’；

novel16反向引物：由miRNA荧光定量PCR试剂盒提供；

所述U6基因的引物序列如下：

U6正向引物：5’-ACAGAGAAGATTAGCATGGCC-3’；

U6反向引物：5’-GACCAATTCTCGATTTGTGCG-3’；

所述pab-miR159a基因的引物序列如下：

pab-miR159a正向引物：5’-CGTTGGTTTGAAGGGAGCTCTAC-3’；

pab-miR159a反向引物：由miRNA荧光定量PCR试剂盒提供；

所述novel1基因的引物序列如下：

novel1正向引物：5’-CTTTCCGGATCCTCCCATGC-3’；

novel1反向引物：由miRNA荧光定量PCR试剂盒提供；

所述cln-miR6725基因的引物序列如下：

cln-miR6725正向引物：5’-TGGCATCTGTCGAGGTCATCTA-3’；

cln-miR6725反向引物：由miRNA荧光定量PCR试剂盒提供；

所述pab-miR395b基因的引物序列如下：

pab-miR395b正向引物：5’-CAGAAGTGTTTGGGGGGACTC-3’；

pab-miR395b反向引物：由miRNA荧光定量PCR试剂盒提供；

所述5SrRNA基因的引物序列如下：

5SrRNA正向引物：5’-CACCAATCCATCCCGAACTT-3’；

5SrRNA反向引物：5’-CCGTCTCCACCAGATAACAAATA-3’。

2.权利要求1所述的柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因的专用引物在柳杉荧光定量中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，检测novel16、U6和pab-miR159a基因的引物序列应用于柳杉干旱胁迫下miRNA荧光定量中；检测novel1和novel16基因的引物序列应用于柳杉热害胁迫下miRNA荧光定量中；检测cln-miR6725和novel16基因的引物序列应用于柳杉低温胁迫下miRNA荧光定量中；检测novel16、cln-miR6725、pab-miR395b和5SrRNA基因的引物序列应用于柳杉盐胁迫下miRNA荧光定量中。