[发明专利]一种检测非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，该检测方法以非洲猪瘟病毒采集猪的口腔拭子、鼻腔拭子、肛门拭子、阴道拭子或乳汁为检测样品，通过ELISA抗体检测方法获得检测样品中IgA的含量。

2.如权利要求1所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，该方法包括如下步骤:

(1)非洲猪瘟病毒重组蛋白的包被，

将纯化后的非洲猪瘟病毒重组蛋白用包被液进行包被，，

(2)洗涤后封闭并进一步洗涤，

(3)加入待检样品，将稀释后的非洲猪瘟病毒阳性样品和阴性样品加入封闭后的96孔板，

(4)加入抗猪IgA酶标抗体，孵育后进一步洗涤，

(5)加入底物溶液，孵育结束后加入终止液，在450nm的波长下读数并记录结果。

3.如权利要求2所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，所述包被液选择碳酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液或磷酸盐缓冲液。

4.如权利要求3所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，所述碳酸盐缓冲液的pH值9.0-10.0、Tris-HCl缓冲液pH值8.2-8.6、磷酸盐缓冲液pH值7.2-7.6。

5.如权利要求2所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，所述封闭液选择含1-10％脱脂乳的PBST、含0.1-3％％BSA的PBST或含1-5％鱼明胶的PBST。

6.如权利要求2所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法，所述包被工作液浓度为0.1-20μg/ml。

7.一种非洲猪瘟的IgA抗体检测试剂盒，所述试剂盒含有非洲猪瘟病毒重组蛋白、包被液、封闭液、抗猪IgA酶标抗体、底物溶液、终止液以及洗涤液，该试剂盒按照权利要求1-6任一项所述的非洲猪瘟病毒IgA抗体的ELISA检测方法完成检测。

8.一种非洲猪瘟病毒的联合检测试剂包，该试剂包包括非洲猪瘟病毒抗原检测试剂盒和权利要求7所述的非洲猪瘟的IgA抗体检测试剂盒。