[发明专利]一种生活用纸制品中17种有机抗菌剂快速筛查方法

权利要求书

1.一种生活用纸制品中17种有机抗菌剂快速筛查方法，其特征是包括以下步骤：

（1）提取：选取生活用纸制品粉碎，混匀，置于容器中加入提取液，摇匀后置于水浴中超声提取，取出容器，冷却至室温，抽滤，将滤液转移至离心管a中，残留的纸制品样品转移至离心管b中备用，向离心管a中加入无水硫酸镁和硫酸铵，涡旋提取，离心，收集上清液于离心管c中，向离心管b中加入乙腈重复萃取一次，水浴超声，抽滤，将滤液转移至离心管a中，涡旋提取，离心，取上清液合并至离心管c中，制得待净化液；

（2）净化：向离心管c中加入乙腈饱和的正己烷，涡旋提取，弃去上层正己烷后，剩余液体全部过无水硫酸钠和石墨化碳黑混合净化柱，收集流出液，再用乙腈淋洗混合净化柱，合并收集流出液，在水浴条件下旋转蒸发浓缩至干，用甲醇水溶液溶解残留物，超声，用有机相滤膜过滤，制得待测液；

（3）标准品制备：取17种有机抗菌剂标准品，用乙腈溶解配制标准品储备液，再用甲醇水溶液稀释配制混合标准工作溶液；

（4）建立超高效液相色谱方法；

（5）建立筛查数据库：优化离子阱-飞行时间质谱仪参数与步骤（4）建立的方法组合，建立超高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱仪检测方法，取步骤（3）标准溶液测定，获得17种有机抗菌剂的准分子离子（MS¹）和碎片离子（MS²）的精确质量数，建立17种有机抗菌剂筛查数据库；

（6）筛查：将步骤（2）制得的待测液用超高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱仪进行测定，获得的样品的MS¹和MS²数据信息与步骤（5）建立的筛查数据库和分子式预测软件进行定性确证，获得生活用纸制品中17种有机抗菌剂的信息；

步骤（1）中所述提取液为乙腈水溶液，所述乙腈水溶液中乙腈与水的体积比为1:1~2:1，第一次萃取时，所述生活用纸制品的质量与所述提取液的体积的比例为1g:10~15mL，重复萃取时所述生活用纸制品的质量与所述乙腈的体积的比例为1g:10~15mL，水浴超声提取时超声频率为30~60kHz，在30~40℃水浴超声15~30min；

步骤（3）中所述17种有机抗菌剂标准品为2-辛基-4-异噻唑啉-3-酮、1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、多菌灵、阿苯达唑、阿苯达唑-2-氨基砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、噻菌灵、麦穗宁、苯扎氯铵、西吡氯铵、劳拉氯铵、苄索氯铵、地喹氯铵、西他氯铵和三氯卡班；

步骤（4）中建立的超高效液相色谱方法中采用的各参数为：C₁₈色谱柱： WatersACQUITY UPLC BEH C₁₈柱，规格为100 mm×2.1 mm，1.7 µm；流速：0.2 mL/min；柱温：25℃~30℃；进样量：20μL；流动相A为：甲醇+乙腈，二者的体积比1：9；流动相B为：10mmol/L乙酸铵溶液或10mmol/L甲酸铵溶液；梯度洗脱程序为：0.00 min：A相，5%，B相，95%；2.00 min：A相，5%，B相，95%；2.10 min：A相，35%，B相，65%；10.00 min：A相，35%，B相，65%；10.10 min：A相，50%，B相，50%；20.00 min：A相，50%，B相，50%；20.10 min：A相，90%，B相，10%；25.00 min：A相，90%，B相，10%；25.10 min：A相，100%，B相，0%；31.00 min：A相，100%，B相，0%；31.50 min：A相，5%，B相，95%；33.00 min：A相，5%，B相，95%；均为体积百分含量；

步骤（5）中离子阱-飞行时间质谱仪参数包括：离子源：ESI，正离子模式，采用自动扫描采集；加热模块温度：150~200℃；CDL温度：150~200℃；雾化器流速：1.3~1.5L/min；干燥气压力：95kPa~110kPa；离子源电压：3.5~4.5 kV；检测器电压：1.6~1.7kV；校准方法：自动调谐优化电压；外标法校准质量数；准分子离子（MS¹）采集范围为m/z 100~450，重复扫描3次~5次，离子累积时间：20msec~40msec；二级碎片离子（MS²）采集范围:m/z 60~450，重复扫描3次~5次，离子累积时间：30 msec~50 msec，前驱离子筛选范围：m/z 100~450；CID能量：50%~70 %；碰撞气：50%~60%；采集频率45.0~67.5kHz。