[发明专利]基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法

权利要求书

1.基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

S1：样品收集和培养：选用不同品种山核桃幼苗栽于培养钵，作为样品放置苗圃中进行缓苗养护；

S2：样品热处理：将幼苗设立对照组和实验组，分别放于热处理环境，热处理环境因素均设置相同，并且设定不同的胁迫温度；

S3：OJIP曲线和参数：测定样品叶片的OJIP曲线与相关的叶绿素荧光参数；

S4：分析与评价：对获得的OJIP曲线进行JIP-test分析，对数据进行处理与绘图，进行单因素方差分析(one-wayANOVA)和Duncan多重比较分析(α＝0.05)，将分析结果统计整理后得到评价结果。

2.根据权利要求1所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S3中，测定样品叶片的OJIP曲线的具体步骤为：

S301：测定前将样品均暗适应20min，向暗适应后的叶片连续照射1s饱和脉冲红光(650nm，3500μmol·m^-2·s^-1)；

S302：选取植株从上往下第4-5片成熟叶片作为测定叶片，采用多功能植物效率分析仪测定样品叶片快速叶绿素荧光诱导动力学曲线，即OJIP曲线，并获得以下叶绿素荧光参数，包括初始荧光Fo(50μs)、反应中心(RCs)、K点(300μs)的荧光水平Fk、J点(2ms)的荧光水平FJ、I点(30ms)的荧光水平FI和P点(0.3-2s)处的最大荧光强度FM。

3.根据权利要求2所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S2和S3中，每天对样品进行快速叶绿素荧光诱导动力学曲线的测定，每个品种的山核桃幼苗选取6株，并且对每株植物进行两次测量，每次测量后，将植物继续热处理。

4.根据权利要求2所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S4中，对获得的OJIP曲线的参数对照表格中的公式加以计算，转换为本发明中所选用的JIP-test试验参数，参照表格为：

表1 OJIP曲线和JIP-test参数的公式说明

5.根据权利要求4所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S4中，进行单因素方差分析的具体步骤为：

分析各组样品的OJIP荧光诱导动力学曲线在不同胁迫温度时的表现、分析各组样品叶片OJIP曲线K相和J相在不同高温时的表现、分析，荧光诱导动力学OJIP曲线与荧光强度和温度之间存在相关性，因此可以分析不同的样品叶片在不同高温胁迫下的伤害程度差异和不同样品的相对可变荧光(ΔVt)的差异。

6.根据权利要求4所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S4中，进行Duncan多重比较分析(α＝0.05)的具体步骤为：

通过W_K＝W_300μs＝(F_300μs-F_O)/(F_j-F_O)计算得出W_K和ΔW_K，并分析W_K和ΔW_K在不同温度的高温胁迫时的变化，分析不同样品在不同温度的高温胁迫下ABS/RC和DIo/RC的变化；

分析各组样品叶片光合性能在不同高温下的表现：Fv/Fm反映PSⅡ的最大光能转换效率，观察在不同温度时各样品值的变动，同时根据各样品的PI_ABS值对植物的耐热能力进行排序；

分析各组样品叶片的PSI和PSII电子传递在不同高温的变化，高温胁迫后样品电子传递连通性越低，表明该样品对温度更加敏感。

7.根据权利要求1所述的基于快速荧光诱导动力学的山核桃耐高温性评价方法，其特征在于，所述S2中，热处理环境具体设置为：光照强度为520-680μmol·m^-2·s^-1，空气相对湿度为65％-75％，每天定时按量补充土壤水分，土壤相对含水量保持在75％-85％，且设定胁迫温度为：轻度高温30℃昼14h/25℃夜10h、中度高温35℃昼14h/25℃夜10h，重度高温40℃昼14h/35℃10h和43℃昼14h/38℃夜10h，以25℃昼14h/20℃夜10h作为对照组(CK)。