[发明专利]一种分泌鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白单抗的杂交瘤细胞、单抗及应用有效
| 申请号： | 202110323314.5 | 申请日： | 2021-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN112980802B | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 云涛;张存;华炯钢;叶伟成;陈柳;倪征;朱寅初 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C07K16/10;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/68 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 分泌 新型 呼肠孤 病毒 蛋白 杂交瘤 细胞 应用 | ||
1.一种分泌鸭新型呼肠孤病毒（novel duck reovirus）σB蛋白单抗的杂交瘤细胞，其特征在于，分类命名为杂交瘤细胞株NDRV YT 2-C10，保藏号为CCTCC NO：C202148。
2.一种鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白单抗，其特征在于，由权利要求1所述杂交瘤细胞分泌。
3.权利要求2所述鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白单抗在制备检测鸭新型呼肠孤病毒的试剂盒中的应用。
4.一种用于鸭新型呼肠孤病毒抗体阻断ELISA检测的试剂盒，其特征在于，包括：
（1）经标记物标记的权利要求2所述鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白单抗；
（2）鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，标记物为HRP或AP。
6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括：封闭液、TMB底物显色液、显色终止液。
7.一种非疾病诊断为目的、用于鸭新型呼肠孤病毒抗体阻断ELISA检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）使用鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白包被ELISA板，然后洗涤去除多余的鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白；
（2）使用封闭液进行封闭，封闭后洗涤去除多余封闭液；
（3）加入待测血清样本孵育，孵育后洗涤去除待测血清样本中未结合的物质；
（4）加入经HRP标记的权利要求2所述鸭新型呼肠孤病毒σB蛋白单抗孵育，孵育后加入TMB底物显色液进行显色；
（5）显色后加入显色终止液终止显色，并用酶标仪读取ELISA板中各孔的OD450nm值；
（6）计算阻断率PI，
PI=（1-被检血清OD450 nm/阴性血清OD450 nm）×100%，
根据阻断率值判断待测血清样本为鸭新型呼肠孤病毒阳性或阴性。
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