[发明专利]一种三七固体发酵产物的制备方法

说明书

本发明公开了一种三七固体发酵产物的制备方法，该方法步骤主要包括：(1)三七固体培养基的制备；(2)粉被虫草液体菌种的制备、接种及发酵培养；(3)三七固体发酵及发酵产物皂苷单体成分含量检测；使用本发明所提出的粉被虫草发酵三七的方法，以三七原药材作为发酵底物，通过一次发酵，使得三七原药材中皂苷的含量发生明显变化，多种皂苷单体含量明显提高，为三七的深度开发利用提供了一条途径。

技术领域

本发明涉及一种三七固体发酵技术及改变三七发酵产物中皂苷的含量的方法。

背景技术

三七（学名：Panax notoginseng(Burkill) F. H. Chen ex C. H.）为五加科人参属多年生直立草本植物，高可达60cm；主根肉质，呈纺锤形，茎暗绿色，茎基部绿色或紫色，指状复叶，轮生茎顶；叶柄具条纹，叶片膜质，伞形花序单生于茎顶，有花100朵左右；总花梗有条纹，苞片多数簇生于花梗基部，卵状披针形；花梗纤细，小苞片多数，花小，淡黄绿色；花萼杯形，稍扁，花丝与花瓣等长；子房下位，果扁球状肾形，种子白色，三角状卵形，7-9月开花，10-12月结果。三七主产于云南文山，主要活性成分为三七总皂苷(Panax notoginsengsaponins，PNS)。目前为止，已从三七中分离出150余种皂苷单体，均属达玛烷型四环三萜皂苷。按其皂苷元类型又可细分为两类：20(S)-原人参二醇型（20(S)-protopanaxadiol）和20(S)-原人参三醇型（20(S)-protopanaxatriol），其中原人参二醇型皂苷包括Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rh2、Rg3、C-K、PPD等；原人参三醇型皂苷包括R1、Rg1、Re、Rh1、F1、PPT等；三七根部皂苷含量较高的是R1、Rg1、Rb1、Rc、Re；含量较少或不含的稀有皂苷为Rd、Rg2、Rg3、Rh1、Rh2、F1、F2、PPD、PPT、C-K等。稀有皂苷在治疗心脑血管疾病、抗肿瘤方面表现出较好的药理活性，例如，人参皂苷Rd对心脑血管、神经系统、免疫系统等作用独特，有可能成为治疗脑卒中、癌症的新型临床治疗药物。人参皂苷Rd在植物中含量少，主要从三七、人参等原植物的根、茎、叶中提取，效率低，成本高。稀有皂苷在三七药材中不含或含量甚微，可在体外通过化学法和生物法进行转化获得，且生物法效率高、无污染，具有较好的应用前景。

粉被虫草 Cordyceps pruinosa Petch 是一种在食品、医药领域有广泛应用的虫草资源，其无性型为粉被玛利娅霉 Mariannaea pruinosa Liang。研究表明粉被虫草具有多种生物学活性，如增强免疫功能、抗菌、抗血小板凝结、对辐射伤害有良好的保护效应和镇痛等作用，是一种是集医药保健、化妆品和生物防治多项开发潜力于一身的生物资源。

三七的主要功效成分是三七总皂苷，其在人体胃肠道中吸收较差，皂苷在胃液作用下只发生轻微的水解反应，代谢产物在肠液中酶或菌的作用下，糖苷键逐步断裂，降解成小分子皂苷才真正发挥药理作用，这不但增加了胃肠负担，而且降低了生物利用度。

发明内容

本发明提供了一种三七固体发酵产物的制备方法，该方法是一种粉被虫草对三七原药材进行生物转化获得活性成分的方法，该方法利用药用真菌粉被虫草发酵三七主根、剪口及须根，提高了三七原药材多种皂苷的含量，特别是一些稀有皂苷的含量，为三七的深度开发利用提供了条件。

本发明方法的操作步骤如下：

（1）在三七主根粗粉、三七剪口粗粉、三七须根粗粉中的一种或几种中添加洋芋粉、蚕蛹粉、葡萄糖、纯水，经121℃灭菌30～40min后，制得三七固体培养基；

所述蚕蛹粉为常规市售产品；