[发明专利]适用于非人源样品的新冠病毒检测系统及其应用在审
| 申请号： | 202110325882.9 | 申请日： | 2021-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN112795475A | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 夏静;朱朝勇 | 申请（专利权）人： | 上海兰卫医学检验所股份有限公司 |
| 主分类号： | C12M1/34 | 分类号： | C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 200335 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适用于 非人 样品 病毒 检测 系统 及其 应用 | ||
1.适用于非人源样品的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述新冠病毒检测系统包括采样管和PCR检测试剂；
所述采样管中装有非人源质控基因。
2.根据权利要求1所述的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述非人源质控基因为含有非人源非病毒的微生物基因的质粒，优选为含有大肠杆菌基因的质粒，进一步优选为含有大肠杆菌核糖体16S rRNA的质粒；
优选地，所述采样管中还包括核酸保存液。
3.根据权利要求1或2所述的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述PCR检测试剂包括非人源质控基因的特异性引物和探针；
优选地，所述PCR检测试剂还包括新冠病毒的特异性引物和探针；
优选地，所述非人源质控基因的探针和所述新冠病毒的探针上标记有荧光基团；
优选地，所述荧光基团包括FAM、HEX、TET、JOE、CY3、VIC或CY5中的任意一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述非人源质控基因的特异性引物包括SEQ ID NO:1～2所示的核酸序列；
优选地，所述非人源质控基因的探针包括SEQ ID NO:3所示的核酸序列。
5.根据权利要求1-4任一项所述的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述新冠病毒的特异性引物的靶基因包括Orf1ab基因和/或N基因；
优选地，所述新冠病毒的特异性引物包括SEQ ID NO:4～5或SEQ ID NO:7～8所示的核酸序列；
优选地，所述新冠病毒的探针包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:9所示的核酸序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的新冠病毒检测系统，其特征在于，所述PCR检测试剂还包括DNA聚合酶、dNTPs或PCR缓冲液中的任意一种或至少两种的组合。
7.一种非人源样品的新冠病毒检测方法，其特征在于，所述新冠病毒检测方法包括以下步骤：
(1)采集非人源样品，置于装有非人源质控基因的采样管中；
(2)从所述采样管中取出样品，提取核酸，并加入PCR检测试剂，进行PCR扩增，根据扩增结果进行分析。
8.根据权利要求7所述的新冠病毒检测方法，其特征在于，所述非人源样品包括冷链食品和/或冷链食品包装。
9.根据权利要求7或8所述的新冠病毒检测方法，其特征在于，所述PCR扩增包括荧光定量PCR和/或数字PCR；
优选地，所述PCR扩增的条件包括：
45～50℃逆转录5～10min；
92～95℃预变性5～10min；
92～95℃变性10～20s，50～55℃退火30～40s，40～45个循环。
10.权利要求1-6任一项所述的新冠病毒检测系统在制备非人源样品的新冠病毒检测试剂盒中的应用。
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