[发明专利]适用于非人源样品的新冠病毒检测系统及其应用

说明书

本发明提供了适用于非人源样品的新冠病毒检测系统及其应用，所述新冠病毒检测系统包括采样管和PCR检测试剂；所述PCR检测试剂包括非人源质控基因的特异性引物和探针、新冠病毒的特异性引物和探针、DNA聚合酶、dNTPs和PCR缓冲液。本发明在采样管中添加非人源质控基因作为内标基因，构建新冠病毒检测系统，适用于非人源样品的新冠病毒检测和质控，提高了非人源样品的检测准确性和可信度，在非人源样品的新冠病毒检测领域具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及适用于非人源样品的新冠病毒检测系统及其应用。

背景技术

目前，对物品(包括冷链食品)或物品包装采样进行新冠病毒检测主要采用适用于人源样品的新冠病毒检测试剂盒，试剂盒中的质控内标基因是人源细胞基因，目的是确保样品采样和实验操作准确无误。但是，人源质控内标基因在物品(包括冷链食品)的采样中是基本不存在的，适用于人源样品的新冠病毒检测试剂盒虽然能够检测新冠病毒，但是无法进行质控，即不能排除由于实验过程错误(核酸提取效率低、样品中漏加试剂或样品、实验程序错误、PCR管质量问题)造成的实验阴性。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了适用于非人源样品的新冠病毒检测系统及其应用，所述新冠病毒检测系统中含有非人源的质控内标基因及其特异性引物和探针，实现了非人源样品的新冠病毒检测和质控。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了适用于非人源样品的新冠病毒检测系统，所述新冠病毒检测系统包括采样管和PCR检测试剂；

所述采样管中装有非人源质控基因。

优选地，所述非人源质控基因为含有非人源非病毒的微生物基因的质粒，优选为含有大肠杆菌基因的质粒，进一步优选为含有大肠杆菌核糖体16S rRNA的质粒。

优选地，所述采样管中还包括核酸保存液。

优选地，所述PCR检测试剂包括非人源质控基因的特异性引物和探针。

优选地，所述PCR检测试剂还包括新冠病毒的特异性引物和探针。

优选地，所述非人源质控基因的探针和所述新冠病毒的探针上标记有荧光基团。

优选地，所述荧光基团包括FAM、HEX、TET、JOE、CY3、VIC或CY5中的任意一种。

优选地，所述非人源质控基因的特异性引物包括SEQ ID NO:1～2所示的核酸序列；

SEQ ID NO:1：TGGAGCATGTGGTTTAATTCGA；

SEQ ID NO:2：TGCGGGACTTAACCCAACA。

优选地，所述非人源质控基因的探针包括SEQ ID NO:3所示的核酸序列；

SEQ ID NO:3：CACGAGCTGACGACARCCATGCA。

优选地，所述新冠病毒的特异性引物包括SEQ ID NO:4～5(Orf1ab基因)或SEQ IDNO:7～8(N基因)所示的核酸序列；

SEQ ID NO:4：CCCTGTGGGTTTTACACTTAA；

SEQ ID NO:5：ACGATTGTGCATCAGCTGA；

SEQ ID NO:7：GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT；

SEQ ID NO:8：CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG。