[发明专利]DCM溶液相对荧光发射强度标准物质及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种DCM溶液相对荧光发射强度标准物质及其制备方法与应用。本发明提供的DCM溶液相对荧光发射强度标准物质可以提供在430‑500nm激发下，发射波长覆盖范围为450‑830nm，波长间隔为1nm的标准相对荧光发射强度值，可以很好地满足相关仪器红光及近红外波段的校准需求。本发明提供的DCM溶液相对荧光发射强度标准物质主要是作为量值传递的标准，满足目前研究和检测的需要，可用于荧光仪器(如光谱仪、分光光度计、酶标仪、基因扩增仪、免疫分析仪等)的检测器、检测模块的校准、分析方法评价，以及生物、食品、药品、化工产品及化妆品中的质量控制等方面。

技术领域

本发明属于分子荧光分析计量技术领域，具体涉及一种DCM溶液相对荧光发射强度标准物质及其制备方法与应用。

背景技术

荧光光谱仪/荧光分光光度计是光谱分析工作中一种重要且有效的分析仪器，荧光检测具有灵敏度高、选择性强、试样量少、无损检测和方法简便等优点。光谱分析不仅在基础研究中是一门重要的学科，在工、农、医、环保、商检、安全和国防等领域也有很多应用。近年荧光光谱的新技术、新器件、新工艺不断涌现，应用面越来越大。光致发光、电致发光、场致发光、激光光谱、时间分辨光谱等方法不断改进完善。而荧光光谱仪的波长校准及相对强度校准是这一切分析和应用的基础。

荧光光谱仪的校准需要使用荧光类标准物质。目前，国内荧光类标准物质主要是GBW(E)130100硫酸奎宁荧光标准物质，其证书中提供了纯度及其不确定度、不同发射波长下荧光发射强度量值及不确定度，其最大激发波长为350nm，最大发射波长为450nm，但在395nm以下或是在565nm以上，其发光强度的标准值较小(0.1)，该范围内不确定度较大，而且标准值的波长间隔长达5nm，已经不适合于一些精密的荧光光谱仪的要求。

国外主要有NIST研制的一系列荧光校准用标准物质(Relative IntensityCorrection Standard for Fluorescence Spectroscopy)，编号为SRM2940～2944，5种标准物质提供了覆盖了从紫外到近红外波长范围(320～800nm)，每隔1nm的RelativeCorrected Emission Intensity(校准相对发射强度)量值。

DCM，IUPAC命名为：4-(二氰基亚甲基)-2-甲基-6-(4-二甲基氨基苯乙烯基)-4H-吡喃，CAS号为51325-91-8。DCM属于D-π-A类荧光染料，是一种成熟的激光染料，最早作为功能性染料进行应用，近几年来发展迅速，该染料也已经商品化，应用于医学、生物学、光化学等诸多领域。

通常，具有电子给体(D)-π桥共轭体系-电子受体(A)结构的有机荧光染料分子在受到光激发后，会发生由电子给体部分向电子受体部分的分子内电荷转移过程。这一过程使得正负电荷分别集中于染料分子内的两个相互分离的基团上，从而导致分子结构、电子结构的重排与分子静态偶极矩的增加。明显的分子内电荷转移性质是有机染料分子具有大Stokes位移和较强光子吸收能力的必要条件之一，因而具有较高的光稳定性、发光亮度和发光效率。

因为其结构和波长的优势，DCM染料在常用的激光染料中占据着重要的作用。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种DCM溶液相对荧光发射强度标准物质，在430-500nm的激发光照射下，其波长覆盖范围为(450-830)nm，波长间隔为1nm，可以很好地满足相关仪器红光及近红外波段的校准需求。本发明提供的相对荧光发射强度标准物质主要是作为量值传递的标准，满足目前研究和检测的需要，可用于荧光仪器(如光谱仪、分光光度计、酶标仪、基因扩增仪、免疫分析仪等)的检测器、检测模块的校准、分析方法评价，以及生物、食品、药品、化工产品及化妆品中的质量控制等方面。

根据本发明的一个方面，提供了一种DCM溶液相对荧光发射强度标准物质，该DCM溶液相对荧光发射强度标准物质可提供在430-500nm激发下，发射波长覆盖范围为450-830nm，波长间隔为1nm的标准相对荧光发射强度值。