[发明专利]一种识别丝织品的桑蚕单克隆抗体的胶体金标记方法在审
申请号: | 202110331517.9 | 申请日: | 2021-03-29 |
公开(公告)号: | CN112986566A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 王秉;闫琳;马维维;彭志勤;万军民 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/532 |
代理公司: | 浙江永航联科专利代理有限公司 33304 | 代理人: | 蔡鼎 |
地址: | 310018 浙江省杭州市钱塘*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 识别 丝织品 桑蚕 单克隆抗体 胶体 标记 方法 | ||
1.一种识别丝织品的桑蚕单克隆抗体的胶体金标记方法,其特征在于包括以下步骤:
1)取超声后分散均匀的胶体金8-12ml,加入碳酸钾溶液调节pH为8.0~9.0;
2)取桑蚕单克隆抗体用pH=8的PBS缓冲液稀释至浓度为10~20ug/ml;
3)将步骤1)所得胶体金以25-35滴/min的速度滴加至步骤2)所得桑蚕单克隆抗体溶液中,室温匀速搅拌45~60min;
4)向步骤3)所得溶液中添加BSA至其终浓度为0.3-0.5wt%,进行蛋白的封闭,继续搅拌8-12min;
5)向步骤4)所得溶液中添加PEG-20000至其终浓度为0.15-0.25wt%,继续搅拌8-12min;
6)将步骤5)所得标记好的胶体金在12000~15000rpm下离心15~30min,弃上清液;
7)沉淀物用含0.8-1.2wt%BSA、0.03-0.05wt%叠氮钠的0.01mol/L的PBS溶液重悬,做防腐处理,冷藏备用。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中,调节pH为8.2。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中,稀释至浓度为20 ug/ml。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中,室温匀速搅拌60min。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤6)中,在12000r/min下离心30 min。
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