[发明专利]一种识别丝织品的桑蚕单克隆抗体的胶体金标记方法在审

专利信息
申请号: 202110331517.9 申请日: 2021-03-29
公开(公告)号: CN112986566A 公开(公告)日: 2021-06-18
发明(设计)人: 王秉;闫琳;马维维;彭志勤;万军民 申请(专利权)人: 浙江理工大学
主分类号: G01N33/577 分类号: G01N33/577;G01N33/532
代理公司: 浙江永航联科专利代理有限公司 33304 代理人: 蔡鼎
地址: 310018 浙江省杭州市钱塘*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 识别 丝织品 桑蚕 单克隆抗体 胶体 标记 方法
【权利要求书】:

1.一种识别丝织品的桑蚕单克隆抗体的胶体金标记方法,其特征在于包括以下步骤:

1)取超声后分散均匀的胶体金8-12ml,加入碳酸钾溶液调节pH为8.0~9.0;

2)取桑蚕单克隆抗体用pH=8的PBS缓冲液稀释至浓度为10~20ug/ml;

3)将步骤1)所得胶体金以25-35滴/min的速度滴加至步骤2)所得桑蚕单克隆抗体溶液中,室温匀速搅拌45~60min;

4)向步骤3)所得溶液中添加BSA至其终浓度为0.3-0.5wt%,进行蛋白的封闭,继续搅拌8-12min;

5)向步骤4)所得溶液中添加PEG-20000至其终浓度为0.15-0.25wt%,继续搅拌8-12min;

6)将步骤5)所得标记好的胶体金在12000~15000rpm下离心15~30min,弃上清液;

7)沉淀物用含0.8-1.2wt%BSA、0.03-0.05wt%叠氮钠的0.01mol/L的PBS溶液重悬,做防腐处理,冷藏备用。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中,调节pH为8.2。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中,稀释至浓度为20 ug/ml。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中,室温匀速搅拌60min。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤6)中,在12000r/min下离心30 min。

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