[发明专利]一种高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞的培养方法有效
申请号: | 202110332346.1 | 申请日: | 2021-03-29 |
公开(公告)号: | CN112779217B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 顾建英;周宇红;卢莉莉;孙磊;吴伟忠;卫传元;高子煦;肖淑秀;宋正清;白金金 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 周一新 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 记忆 表型 肿瘤 浸润 淋巴细胞 培养 方法 | ||
1.一种高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)无菌切取肿瘤组织置于培养液中,在无菌、冷链条件下保存;
所述肿瘤组织来源于黑色素瘤浸润淋巴结,瘤体大小≥1cm3;
(2)将步骤(1)所述肿瘤组织的瘤体机械剪碎、消化,获取单细胞悬液,分离提取肿瘤浸润T淋巴细胞;
(3)将步骤(2)所述肿瘤浸润T淋巴细胞加入到含有分离诱导培养液的培养基中进行体外扩增和诱导分化,培养7–21天后得到高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞的细胞悬液;其中,所述分离诱导培养液为含有IL-2、IL-7、IL-15的培养基,且IL-2、IL-7、IL-15的浓度分别为10ng/mL、10ng/mL、20ng/mL。
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