[发明专利]一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊及其制备方法

权利要求书

1.一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将金枪鱼骨清洗、破碎，蒸煮，去除鱼骨上的碎肉，粉碎鱼骨，得到鱼骨粉；

（2）往鱼骨粉中加入水，搅拌均匀，得到鱼骨溶浆；

（3）采用柠檬酸调节鱼骨溶浆的pH，加入酸性蛋白酶搅拌均匀，酶解，得到鱼骨酶解液；

（4）往鱼骨酶解液中接种乳酸菌菌粉，加入葡萄糖，发酵；

（5）发酵结束后灭酶，冷却至室温后，离心取上清液，采用分子筛超滤膜分离，收集滤液，得到功能肽溶液，对功能肽溶液进行真空冷冻干燥得到功能肽粉；

（6）将制得的功能肽粉进行双层包覆，得到功能肽微胶囊；所述功能肽微胶囊的制备过程为：将醋酸纤维素溶于乙醇中，加入淀粉混合均匀，滴加二聚丙三醇，继续加入蚕丝蛋白纤维和二月桂酸二丁基锡，升温至50-55℃反应，反应完毕后加入功能肽粉，并继续搅拌至全部溶解，均质，所得溶液进行喷雾干燥，制得单层包覆微胶囊；将壁材各组分按照比例混匀，加入上述单层包覆微胶囊混匀采用均质机进行乳化均质处理，单层包覆微胶囊与壁材的质量比为5：1 ~10：1，再进行喷雾干燥，得到功能肽微胶囊；醋酸纤维素、乙醇、淀粉、二聚丙三醇、蚕丝蛋白纤维、二月桂酸二丁基锡及功能肽粉的比例为20-22g:450-480mL:15-18g:40-45 mL:12-16g:0.5-0.8g:15-20g。

2.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，金枪鱼骨蒸煮30-40min，用破碎机将鱼骨粉碎至80目以下。

3.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，加入水的重量为鱼骨粉重量的3-4倍。

4.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，采用5~5.5M的柠檬酸将鱼骨溶浆的pH调节至3.0~3.5，加入鱼骨粉重量0.25~0.75%的酸性蛋白酶，采用38~42℃水浴酶解3~3.2h。

5.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，接种鱼骨粉重量0.1~0.3%的乳酸菌菌粉，加入鱼骨粉重量4-6%的葡萄糖，发酵时间为10~12h。

6.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，发酵结束后在92-98℃水浴中灭酶10~15min，冷却至室温后，4000~4200rpm离心10~15min取上清液，得到功能肽溶液，采用截留分子量为1000 Da的超滤膜分离，收集滤液。

7.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，真空冷冻干燥的条件：将功能肽溶液分装于冷冻盘中，高度16~20mm，置于-80~-75℃的冰柜中，预冻8~10h，转移至真空干燥机中，温度设定为-66~-62℃，冻干时间24~36h，冻干得到功能肽粉。

8.根据权利要求1所述的一种促进成骨前体细胞增殖的功能肽微胶囊的制备方法，其特征在于，壁材组分及质量比：瓜尔豆胶、黄原胶、白糊精、桔子油香精、胡萝卜素、柠檬酸钠、苯甲酸、白砂糖及水＝160~165g：182~185g：300~310g：182~185g：57~60g：380~390g：36~40g：30~35g：50~60g。