[发明专利]一种高安全性的非灭活型病毒保存液及制备方法

权利要求书

1.一种高安全性的非灭活型病毒保存液，其特征在于，包括hanks基础液、抗生素药剂、蛋白保护剂、冷冻保护剂和营养剂，所述蛋白保护剂包括牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化钠以及苯甲酸钠，所述冷冻保护剂包括海藻酸钠、聚乙二醇、葡萄糖，所述营养剂包括天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸，所述抗生素药剂包括庆大霉素、安氯西林钠和丁胺卡那霉素；

所述非灭活病毒保存液中各物质的重量配比为：hanks基础液100份、抗生素药剂4份、蛋白保护剂3份、冷冻保护剂1份和营养剂1份；

所述蛋白保护剂中各物质的重量配比为：牛血清白蛋白10份、甘露醇8份、甘油2份、丁二醇6份、氯化钠3份、苯甲酸钠3份以及水100份；

所述冷冻保护剂中各物质的重量配比为：海藻酸钠15份、聚乙二醇9份、葡萄糖9份以及水100份；

所述营养剂中各物质的重量配比为：天冬酰胺3份、谷氨酰胺3份、苏氨酸3份、天冬氨酸2份、缬氨酸2份、亮氨酸2份、异亮氨酸1份以及水100份；

所述抗生素药剂中各物质的重量配比为：庆大霉素5份、安氯西林钠2份、丁胺卡那霉素4份以及水50份；

用于配制上述病毒保存液的装置包括配置筒、高压灭菌筒、冷却装置和保存筒；所述配置筒置于一振动器中，所述振动器包括前后两块立板，所述立板之间设有一圆柱面板，所述立板与所述圆柱面板之间通过弹簧连接，所述圆柱面板内侧设有一圈海绵垫，所述圆柱面板的内径略大于所述配置筒的外径，当所述配置筒置于所述振动器中时会挤压所述海绵垫，所述海绵垫起到缓冲以及夹持的作用，所述圆柱面板的底部设有夹件用于夹持所述配置筒的底部防止所述配置筒在所述圆柱面板内上下滑动，所述圆柱面板与其中一块立板之间设有一块推板，所述推板为圆弧形并与所述圆柱面板吻合，所述推板面对所述圆柱面板的一侧设有缓冲垫，所述推板另一侧与连杆连接，所述连杆的另一端与凸轮连接，所述凸轮与电机的输出轴连接，所述连杆与所述凸轮接触的一端为圆球形以减小连杆与凸轮之间的摩擦力，所述连杆穿过立板并在立板上设有限位块用来固定连杆的方向，电机工作时，所述连杆在所述凸轮的作用下来回运动，所述配置筒在所述推板的推力作用下与所述圆柱面板一起朝一个方向运动，随后又在弹簧的弹力作用下朝反方向运动，不断重复实现振荡效果，使配置筒内的溶液更快地均匀混合，所述配置筒的底部设有可开闭的开口，所述开口通过软管与所述高压灭菌仓连通；所述高压灭菌筒包括灭菌仓，所述灭菌仓上方设有一输液管和安全泄压阀，所述灭菌仓下方设有出液管，所述输液管与所述配置筒相连，所述出液管与所述保存筒相连，所述输液管和所述出液管上设有密闭性良好的的开关，当所述出液管、出液管和所述安全泄压阀均处于关闭状态时，所述灭菌仓为一封闭空间，所述灭菌仓外壁上还设有电加热管路，所述电加热管路与PLC控制器连接，所述PLC控制器用于控制所述电加热管路的加热功率，所述灭菌仓内壁上还装有温度感应器和气压感应器，所述温度感应器和所述气压感应器通过设置在所述灭菌仓壁上的线路与所述PLC控制器相连，所述PLC控制器将实时接收所述温度感应器和所述气压感应器上报的温度和气压信息，并根据所述温度和气压信息控制所述安全泄压阀的打开状态，使所述灭菌仓内保持预设的温度和气压进行灭菌，所述灭菌仓外侧设有安全罩，所述安全罩上设有控制面板，所述控制面板与所述PLC控制器连通，通过所述控制面板能够对灭菌的温度、气压以及时间进行设定，所述安全罩内设有隔热防护层，所述隔热防护层内设有隔热防护垫，所述隔热防护层将隔绝热量从所述灭菌仓内传递到安全罩外，既保证了安全性，又确保了能源的利用率，为所述电加热管路提供电能的电源组件安装在所述灭菌仓与所述安全罩之间，所述PLC控制器还设有自我保护机制，当所述温度感应器检测的温度或是所述气压感应器检测的气压超过阈值时，将自动切断电源，所述灭菌仓与所述安全罩之间还设有冷凝管，在高压高温灭菌完成后，将启动所述冷凝管对灭菌仓作初步的降温处理；所述冷却装置为杯体，所述保存筒置于所述杯体中，所述杯体的杯壁包括内外两层，内层杯壁中设有螺旋管道，所述螺旋管道内装有冷却剂，外层杯壁上设有一条竖直管道，所述竖直管道上方与所述螺旋管道上方连通，所述竖直管道上装有微型液泵，所述杯体底部设有换热装置，所述竖直管道下方与所述螺旋管道下方通过所述换热装置连通形成闭环，所述冷却剂在所述螺旋管道中缓慢下降，吸收所述保存筒中大量的热量，经由所述换热装置释放大量热量后，在微型液泵的作用下通过所述竖直管道上升至所述螺旋管道上方，不断重复达到降低所述保存管中液体温度的作用，所述换热装置包括蛇形管道，所述蛇形管道的两端分别与所述竖直管道和所述螺旋管道连通，所述蛇形管道置于换热池中，所述换热池上方设有蒸汽回收腔，所述蒸汽回收腔内装有压缩机构，所述蒸汽回收腔的外部装有散热片，所述散热片通过热导棒与所述蒸汽回收腔内部连通，当所述换热池中的液体吸热蒸发至所述蒸发回收腔，并在所述压缩机构的压缩作用下重新变回液态，在压缩过程中释放的热量通过导热棒传递到所述散热片并扩散到空气中，所述蒸汽回收腔上设有腔门，在压缩过程中腔门处于关闭状态，所述腔门上设有若干个可开闭的小孔，当压缩完成后小孔打开，压缩形成的液体通过小孔下落至换热池中；

用于配制上述病毒保存液的装置还包括一种存储所述病毒保存液的试管，包括试管体、密封帽和储油包，所述密封帽设有内螺纹，所述试管体上端设有外螺纹，所述密封帽螺接在所述试管体上端，所述储油包设置在所述试管体内壁上，所述密封帽拧紧时，能防止试管内液体泄露，所述密封帽内设有内搅拌棒和固定套，所述固定套的竖直部固定在所述密封帽上，所述密封帽的顶端设有方便挤压所述搅拌棒下压的开口，所述开口的直径大于所述搅拌棒的直径，小于所述固定套的直径，所述搅拌棒的上端内壁上设有下压挡片，所述搅拌棒的上端一侧设有尖刺体，当所述密封帽拧紧时，所述尖刺体会与所述储油包的上方，下压所述搅拌棒后，所述尖刺体会刺破所述储油包，所述储油包中的油性液体会覆盖在病毒保存液的上方，防止病毒外泄。

2.制备如权利要求1所述的一种高安全性的非灭活型病毒保存液的方法，包括以下步骤：制备抗生素药剂：按所述抗生素药剂中各物质的比例量取庆大霉素、安氯西林钠和丁胺卡那霉素并溶于水中，搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟，然后冷却至10℃保存备用；制备蛋白保护剂：按所述蛋白保护剂中的所述各物质的重量比例量取牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化钠和苯甲酸钠并溶于水中，搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟，然后冷却至10℃保存备用；制备冷冻保护剂：按所述冷冻保护剂中所述各物质的重量配比的比例量取海藻酸钠、聚乙二醇和葡萄糖并溶于水中，搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟，然后冷却至10℃保存备用；制备营养剂：按所述营养剂中的所述各物质的重量配比比例量取天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸并溶于水中，搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟，然后冷却至10℃保存备用；将上述制备的抗生素药剂、蛋白保护剂、冷冻保护剂和营养剂分别取对应的分量加入到所述hanks基础液中，搅拌均匀后将混合溶液的PH值调整至4.5~5.2，进行封装并保存在-10℃的环境中。