[发明专利]一种高安全性的非灭活型病毒保存液及制备方法有效
申请号: | 202110336321.9 | 申请日: | 2021-03-29 |
公开(公告)号: | CN113046412B | 公开(公告)日: | 2021-12-14 |
发明(设计)人: | 董占龙;龙波;翟赢;梁欣裕;覃玲 | 申请(专利权)人: | 深圳市麦瑞科林科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24 |
代理公司: | 深圳中圳知识产权代理事务所(普通合伙) 44768 | 代理人: | 李健威 |
地址: | 518116 广东省深圳市龙岗区宝*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 安全性 非灭活型 病毒 保存 制备 方法 | ||
本发明提供了一种高安全性的非灭活型病毒保存液及制备方法,该保存液包括hanks基础液、抗生素药剂、蛋白保护剂、冷冻保护剂和营养剂,所述蛋白保护剂包括牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化钠以及苯甲酸钠,所述冷冻保护剂包括海藻酸钠、聚乙二醇、葡萄糖,所述营养剂包括天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸,所述抗生素药剂包括庆大霉素、安氯西林钠和丁胺卡那霉素。通过抗生素药剂抑制细菌及真菌的对病毒的影响,通过蛋白质保护剂使病毒的蛋白质外壳受到保护,通过冷冻保护剂使保护液能在低温下稳定性能,通过营养剂使病毒能够在保护液中存活。
技术领域
本发明涉及医疗技术领域,尤其涉及一种高安全性的非灭活型病毒保存液及制备方法。
背景技术
病毒保存液使用与新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,时采样管内浸没采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。
现在已经开发出了很多非灭活病毒保存液,经过我们大量的检索与参考,发现现有的保存液有如公开号为KR1020100015613A,KR1020170095270A和KR1020100049506A所公开的保存液,采用非离子型表面活性剂温和细胞,提供的核酸稳定缓冲液在低温运输和保存,有效保证病毒核酸免遭降解,降低检测假阴性结果,而且,本发明的病毒保存液中不含PCR抑制剂,可免核酸提取操作,直接作为样本模板进行后续PCR核酸检测实验。但该保护液保存的病毒具有较强的活性,在操作过程中若出现不当处理会造成病毒感染。
发明内容
本发明的目的在于,针对所存在的不足,提出了一种高安全性的非灭活型病毒保存液。
为了克服现有技术的不足,本发明采用如下技术方案:
一种高安全性的非灭活型病毒保存液,其特征在于,包括hanks基础液、抗生素药剂、蛋白保护剂、冷冻保护剂和营养剂,所述蛋白保护剂包括牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化钠以及苯甲酸钠,所述冷冻保护剂包括海藻酸钠、聚乙二醇、葡萄糖,所述营养剂包括天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸,所述抗生素药剂包括庆大霉素、安氯西林钠和丁胺卡那霉素;
进一步的,所述非灭活病毒保存液中各物质的重量配比为:hanks基础液100份、抗生素药剂4份、蛋白保护剂3份、冷冻保护剂1份和营养剂1份;
进一步的,所述蛋白保护剂中各物质的重量配比为:牛血清白蛋白10份、甘露醇8份、甘油2份、丁二醇6份、氯化钠3份、苯甲酸钠3份以及水100份;
进一步的,所述冷冻保护剂中各物质的重量配比为:海藻酸钠15份、聚乙二醇9份、葡萄糖9份以及水100份;
进一步的,所述营养剂中各物质的重量配比为:天冬酰胺3份、谷氨酰胺3份、苏氨酸3份、天冬氨酸2份、缬氨酸2份、亮氨酸2份、异亮氨酸1份以及水100份;
进一步的,所述抗生素药剂中各物质的重量配比为:庆大霉素5份、安氯西林钠2份、丁胺卡那霉素4份以及水50份。
制备如上述一种非灭活型病毒保存液的方法,包括以下步骤:
制备抗生素药剂:按上述比例量取庆大霉素、安氯西林钠和丁胺卡那霉素并溶于水中,搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟,然后冷却至10℃保存备用;
制备蛋白保护剂:按上述比例量取牛血清白蛋白、甘露醇、甘油、丁二醇、氯化钠和苯甲酸钠并溶于水中,搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟,然后冷却至10℃保存备用;
制备冷冻保护剂:按上述比例量取海藻酸钠、聚乙二醇和葡萄糖并溶于水中,搅拌均匀后进行120℃高压灭菌15分钟,然后冷却至10℃保存备用;
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