[发明专利]一种检测耳聋基因的参考品及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种检测耳聋基因的参考品，其特征在于，包括：片段化的母体基因组DNA和片段化的胎儿基因组DNA。

2.根据权利要求1所述的参考品，其特征在于，片段化的母体基因组DNA的耳聋基因位点突变为野生型、纯合突变或杂合突变；片段化的胎儿基因组DNA的耳聋基因位点突变为野生型、纯合突变或杂合突变。

3.根据权利要求1所述的参考品，其特征在于，片段化的母体基因组DNA包括来源于母体组织或外周血的基因组的片段化核酸；片段化的胎儿基因组DNA包括来源于胎儿组织或外周血的基因组的片段化核酸；所述片段化的母体DNA和片段化的胎儿DNA的片段大小分别为150-200bp。

4.根据权利要求1-3任一项所述的参考品，其特征在于，片段化的胎儿基因组DNA的含量占参考品总量的5-30％。

5.一种用于检测耳聋基因的参考品的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下步骤：

S1、分别提取、纯化母体样本和胎儿样本的基因组DNA；

S2、将步骤S1所得的基因组DNA片段化；

S3、将步骤S2片段化的母体基因组DNA和胎儿基因组DNA按比例配制成参考品，其中，片段化的胎儿基因组DNA的含量占参考品总量的5-30％。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述母体样本的耳聋基因SLC26A4 c.1174AT位点为野生型或杂合突变；所述胎儿样本的耳聋基因SLC26A4 c.1174AT位点为野生型、纯合突变或杂合突变。

7.一种用于检测耳聋基因突变型与缺失型的引物组，其特征在于，所述引物组包括如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.44所示的引物。

8.根据权利要求1所述的参考品在制备用于检测耳聋基因试剂中的应用。

9.一种检测耳聋基因的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的参考品或权利要求7所述的引物组。

10.一种检测胎儿耳聋基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：筛选SNP位点；提取孕妇血浆中游离DNA和权利要求1所述的参考品并构建相应的DNA文库，进行模板制备和富集；对所述游离DNA和参考品进行文库测序；构建所述耳聋基因上SNP位点的基因型，结合所述游离DNA和参考品文库测序信息，确定胎儿所述SNP位点相应的基因型，所述方法不以疾病的诊断和治疗为目的。