[发明专利]一株绵羊肺炎支原体强毒株及其应用

说明书

本发明公开了一株绵羊肺炎支原体强毒株及其应用，所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2020907，保藏日期为2020年12月14日。所述的应用为上述绵羊肺炎支原体在感染发病和制备治疗羊支原体肺炎药物中的应用。本发明的绵羊肺炎支原体强毒株培育采用的支原体培养基，其制备简便、成本低、培养支原体变色快且滴度高。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株绵羊肺炎支原体强毒株及其在建立绵羊肺炎支原体感染发病模型中的应用。

技术背景

羊支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of sheep and goat,MPSG)是由绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)引起的一种绵羊和山羊慢性呼吸道传染病。该病主要以气喘为临床特征，在世界范围内广泛流行，山羊和绵羊都较易感，几乎普遍存在，给养羊业造成了重大损失。建立绵羊肺炎支原体感染发病模型是研究该病的重要前提。由于支原体难于培养，且绵羊肺炎支原体毒力较弱，难以发病，给感染发病模型的建立带来了困难，严重制约了该病的研究。

文献“白永平，绵羊肺炎支原体的分离鉴定与敏感药物试验的研究，四川农业大学，2011”中的23页报道，随着传代的次数增加，绵羊肺炎支原体分离株的生长速度增快，由最初的10天左右缩短到3-5天。由上述报道可见，由于绵羊肺炎支原体对营养要求苛刻，培养较为困难，且生长变色速度慢，需3-10天。

疫苗研究文献报道用绵羊肺炎支原体感染羊的发病肺组织、胸水等制备灭活疫苗，对于防控具有一定效果；后来在组织中加入经处理的支原体培养物，制成灭活疫苗，结果表明对羊支原体肺炎具有有效保护。但组织灭活苗由于其需用羊病肺组织，易被细菌污染，且质量难以控制。后续疫苗研究相关文献报道支原体增殖后，测定生长滴度并进行超滤浓缩，使绵羊肺炎支原体菌液浓度达到6.0×10⁸-10.0×10⁸CCU/mL，然后再进行配苗，具有较好免疫保护效果。但疫苗制备中抗原需要浓缩，导致了疫苗制备周期长，成本高，杂蛋白浓度上升，影响了该疫苗的生产和应用。因此，急需可用纯培养物且不需要浓缩即可制备疫苗的菌株和工艺，来制备具有良好保护效力的疫苗，满足市场需求。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种绵羊肺炎支原体强毒株。

本发明还要解决的技术问题是提供上述绵羊肺炎支原体强毒株在建立绵羊肺炎支原体感染发病模型中的应用。

本发明最后要解决的技术问题是提供上述绵羊肺炎支原体强毒株在制备治疗绵羊肺炎支原体感染引起疾病药物中的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一株绵羊肺炎支原体强毒株，所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株，已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编430072，保藏编号：CCTCCNO：M 2020907。该菌株是发明人于2018年于南京某羊场自行采集病料，经分离、纯化和鉴定，获得一株绵羊肺炎支原体。

在一些实施方式中，所述绵羊肺炎支原体的热应激蛋白70与其他绵羊肺炎支原体的相似性为95.76％-98.51％。

在一些典型实施方式中，所述绵羊肺炎支原体的热应激蛋白70的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了一种绵羊肺炎支原体强毒株在建立绵羊肺炎支原体感染发病模型中的应用。