[发明专利]不饱和多黏菌素及其双键位置的判定方法

权利要求书

1.一种不饱和多黏菌素中双键位置的判定方法，其特征在于，所述不饱和多黏菌素在光照条件下生成环氧化多黏菌素或/和二羟基化多黏菌素，经高效液相色谱-高分辨质谱或/和高效液相色谱-二级质谱确证组分的结构，即可判定所述不饱和多黏菌素中双键的位置。

2.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，所述不饱和多黏菌素包括不饱和多黏菌素E或/和不饱和多黏菌素B。

3.根据权利要求2所述的判定方法，其特征在于，所述不饱和多黏菌素E包括不饱和多黏菌素E1、不饱和多黏菌素E2、不饱和多黏菌素E3、不饱和多黏菌素E4、不饱和多黏菌素E6、不饱和多黏菌素E1-7'MOA、不饱和多黏菌素E1-I、不饱和多黏菌素E2-I、不饱和多黏菌素E1-Val、不饱和多黏菌素E2-Val、不饱和多黏菌素E1-Ser或不饱和多黏菌素E2-Ser中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，所述不饱和多黏菌素在光照前溶解所选用的溶剂包括水、乙腈、甲醇、丙酮、乙醛、N,N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的判定方法，其特征在于，所述不饱和多黏菌素在光照前溶解所选用的溶剂为水：乙腈，其体积比为9:1-1:9，且所述不饱和多黏菌素溶解后的终浓度为0.1mg/mL-20mg/mL。

6.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，所述光照所选用的光源为紫外灯，其紫外波长为190nm-400nm；所选用的照射时间为0.5h-24h。

7.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，所述高效液相色谱所选用的反相色谱柱，其填料包括十八烷基键合的硅胶基质、八烷基键合的硅胶基质或四烷基键合的硅胶基质中的一种或多种，柱长为5-30cm，直径为1-10mm，填料粒径为1-10μm；所选用的流动相A为含三氟乙酸的水溶液：乙腈，其体积比为99:1-80:20，所述三氟乙酸的含量为0.01％-1％；所选用的流动相B为含甲酸或/和乙酸的甲醇或/和乙腈溶液，所述甲酸或/和乙酸的含量为0.01％-1％；所选用的洗脱方式为等度洗脱，所述流动相A与所述流动相B的洗脱体积比为70:30-95:5；所选用的流速为0.5mL/min-1.5mL/min；所选用的柱温为20℃-50℃；所选用的进样体积为1μL-100μL。

8.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，所述高分辨质谱以及所述二级质谱所选用的扫描范围均为m/z 50-1700；所述二级质谱所选用的碰撞能量设置范围为5-50eV。

9.一种不饱和多黏菌素，其特征在于，所述不饱和多黏菌素为2',3'-脱氢多黏菌素E1，其结构如式(I)所示；采用如权利要求1所述的判定方法，所述2',3'-脱氢多黏菌素E1在光照条件下生成2',3'-环氧化多黏菌素E1和2',3'-二羟基化多黏菌素E1，经高效液相色谱-二级质谱确证：所述2',3'-环氧化多黏菌素E1的结构如式(II)所示，其分子量为m/z592.38([M+2H]²⁺)，其特征离子为m/z 857.53、757.45、456.29、255.17、155.11和127.11；所述2',3'-二羟基化多黏菌素E1的结构如式(III)所示，其分子量为m/z 601.38([M+2H]²⁺)，其特征离子为m/z 875.53、775.47、474.29、273.18、155.11和113.10；

10.一种不饱和多黏菌素，其特征在于，所述不饱和多黏菌素为2',3'-脱氢多黏菌素E2，其结构如式(IV)所示；采用如权利要求1所述的判定方法，所述2',3'-脱氢多黏菌素E2在光照条件下生成2',3'-环氧化多黏菌素E2和2',3'-二羟基化多黏菌素E2，经高效液相色谱-二级质谱确证：所述2',3'-环氧化多黏菌素E2的结构如式(V)所示，其分子量为m/z585.37([M+2H]²⁺)，其特征离子为m/z 843.50、743.44、442.27、342.20、241.16、141.09和113.09；所述2',3'-二羟基化多黏菌素E2的结构如式(VI)所示，其分子量为m/z 594.38([M+2H]²⁺)，其特征离子为m/z 861.15、761.46、460.28、259.17和141.09；